转染miR-145对肝癌细胞系SMMC-7721增殖和凋亡的影响

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目的:研究miR-145对肝癌细胞株SMMC-7721增殖、细胞周期和凋亡的影响,评价其在肿瘤发生发展中的作用。方法:常规培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用脂质体将miR-145质粒转染入肝癌细胞株SMMC-7721中,实验分为3组:空白对照组,空载质粒转染组,miR-145质粒转染组,感染后72h,荧光显微镜下观察细胞,通过绿色荧光蛋白(GFP)表达判断细胞的感染效率,实时定量RT-PCR检测各组细胞miRNA-145的表达,用MTT法检测肝癌细胞的增殖能力,应用流式细胞仪检测细胞的凋亡及周期改变。结果:荧光显微镜下观察细胞转染效率达80%。RT-PCR结果显示:miR-145转染组的miR-145表达水平较空载质粒转染组,空白对照组明显上调。MTT法结果显示:miR-145转染组的增殖抑制率明显高于空载质粒转染组和空白对照组(P<0.05)。流式细胞仪显示转染miR-145质粒增加细胞内miR-145表达后, G1期延长,凋亡率增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-145可以抑制肝癌细胞的生长,可以将细胞周期阻滞在G0/G1期,促进细胞凋亡。说明miR-145在HCC发生发展中发挥抑癌基因作用,为诊断治疗HCC提供了新思维。
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