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目的:本研究通过新蒲饮联合奥美拉唑对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)相关性胃炎小鼠模型进行干预,探讨新蒲饮联合奥美拉唑根除H.pylori的疗效以及通过对Toll样受体 2(Toll-like receptor-2,TLR-2)/髓样分化因子 88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)/核转录因子κappaB(Nuclear Factor κappa B,NF-κB)信号通路的干预作用,对下游的炎症因子肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素1 β(Interleuκin-1β,IL-1β)的影响,从而为临床根除H.pylori以及治疗幽门螺杆菌相关性胃炎的治疗提供实验基础以及新的方法、思路。方法:将50只清洁级6-8周雌雄各半的C57BL/6小鼠按随机数字表法分为5组:正常组、模型组、新蒲饮组、新蒲饮加奥美拉唑(PPI)组、西药三联组(阿莫西林+克拉霉素+奥美拉唑)。正常组仅予生理盐水灌胃,而剩余4组即模型组、新蒲饮组、新蒲饮加PPI组、西药三联组进行幽门螺杆菌相关性胃炎小鼠造模:将实验小鼠适应性饲养7天之后,开始接种H.pylori菌液,灌胃3次(隔日一次)。最后一次灌胃4周后随机从各组中抽取雌雄小鼠各一只,用快速尿素酶试验(rapid urease test,RUT)以及吉姆萨染色法(Giemsa stain)检验造模是否成功。造模成功后新蒲饮组、新蒲饮加PPI组、西药三联组予相应浓度药物灌胃,正常组及模型组给予生理盐水灌胃,2次/日,共2周。干预结束28天之后处死所有的小鼠模型。用RUT法以及Giemsa染色法检测H.pylori的根除情况,并在光镜下观察伊红染色(Hematoxylin-eosin staining,HE)切片了解胃黏膜的炎症情况;应用免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)技术检测胃组织中 TLR-2、MyD88、NF-κB 的蛋白含量表达;Western免疫切迹(WesternBlot)技术检测胃组织中TLR-2、MyD88、NF-κB、IκB激酶-α(IκK kinasa-α,IκK-α)、磷酸化 IκB-α(Phosphorylation IκB-α,p-IκB-α)蛋白含量表达;实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR,QPCR)技术检测胃组织中TLR-2、MyD88、NF-κB 的基因表达水平;最后应用酶联免疫吸附法(Enzyme:linked:immunosorbent:assay,ELISA)检测血清中 TNF-α、IL-1β的含量变化。结果:1.H.pylori感染相关性胃炎小鼠模型的症状:幽门螺杆菌相关性胃炎小鼠造模后,观察各组小鼠的外在表现,发现造模的小鼠胃部炎性症状更加明显。之后给予药物干预后,新蒲饮组、新蒲饮+PPI组、西药三联组症状与模型组比较改善明显,且新蒲饮+PPI组、西药三联组优于新蒲饮组。2.H.pylori根除情况:正常组H.pylori感染均阴性,模型组H.pylori感染均阳性;与模型组相比,新蒲饮组、新蒲饮+PPI组、西药三联组H.pylori根除率升高,新蒲饮+PPI组、西药三联组H.pylori根除率高于新蒲饮组。3.HE染色观察胃黏膜炎症情况:正常组未见明显炎症变化,模型组可见明显的炎症病理变化,与模型组比较,新蒲饮组、新蒲饮+PPI组、西药三联组炎症病理变化改善,新蒲饮加PPI组与西药三联组病理情况较新蒲饮组减轻。4.IHC技术检测结果;与正常值相比,模型组小鼠胃黏膜中TLR2、MyD88、NF-κB的表达显著高于正常组(P<0.01);与模型组相比,新蒲饮组、新蒲饮+PPI组和西药三联组小鼠胃组织中的表达量显著降低(P<0.01);与新蒲饮组相比,新蒲饮+PPI组、西药三联组小鼠胃粘膜组织中的表达量显著降低(P<0.05),新蒲饮+PPI组的表达量低于西药三联组(P>0.05)。5.QPCR技术检测结果:与正常值相比,模型组小鼠胃黏膜中TLR2、MyD88、NF-κB mRNA的表达量显著高于正常组(P<0.01);与模型组相比,新蒲饮组、新蒲饮+PPI组和西药三联组小鼠胃组织中mRNA的表达量显著降低(P<0.01);与新蒲饮组相比,新蒲饮+PPI组、西药三联组小鼠胃粘膜组织中mRNA的表达量显著降低(P<0.05),新蒲饮+PPI组mRNA的表达量低于西药三联组,但无显著性差异(P>0.05)。6.Western Blot技术检测结果:与正常组相比,模型组小鼠胃黏膜中MyD88、NF-κB、IκK-α、p-IκB-α的蛋白表达量显著升高(P<0.01);与模型组相比,新蒲饮组、新蒲饮+PPI组和西药三联组小鼠胃组织中的蛋白表达量显著降低(P<0.01);与新蒲饮组相比,新蒲饮+PPI组、西药三联组小鼠胃组织中的蛋白表达量显著降低(P<0.05);新蒲饮+PPI组的表达量低于西药三联组,但无显著性差异(P>0.05)。7.Elisa技术检测结果:与正常组相比,模型组小鼠血清中TNF-α、IL-1β的表达量显著升高(P<0.01);与模型组相比,新蒲饮组、新蒲饮+PPI组和西药三联组小鼠血清中表达量显著降低(P<0.01);与新蒲饮组相比,新蒲饮+PPI组、西药三联组小鼠血清中的表达量显著降低(P<0.05),新蒲饮+PPI组血清中TNF-α、IL-1β的表达量低于西药三联组,但比较无显著性差异(P>0.05)。结论:1.H.pylori及其致病因子通过激活TLR-2/MyD88/NF-κB信号通路,引起下游炎症因子TNF-α、IL-1β释放,从而导致慢性胃炎的发生;2.新蒲饮,新蒲饮联合PPI以及西药三联具有清除H.pylori的功效。新蒲饮与PPI合用清除H.pylori的效果更佳,堪比西药三联。3.新蒲饮以及新蒲饮加PPI可能通过清除H.pylori以及抑制TLR-2/MyD88/NF-κB信号通路的激活及TNF-α、IL-1β的释放而发挥其抗炎作用,而新蒲饮联合PPI效果更加显著