咪唑类聚合物修饰电极的制备及其在生物分析中的应用

来源 :上海师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:muyiwenwu
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抗坏血酸(AA)是一种可溶性维生素,广泛存在于食品、动物体液及组织以及药品中。由于其具有抗氧化性,故可以用于精神疾病、不孕不育和艾滋病的防治和治疗。多巴胺(DA)是哺乳类动物中枢神经系统内重要的信息传递物质,它属于儿茶酚胺类药物,临床上广泛用于由心肌梗死、创伤、肉毒素败血症、心脏手术、肾功能衰竭、充血性心力衰竭等引起的休克综合征的治疗。尿酸(UA)是核酸组成单位中嘌呤核苷酸分解代谢的产物,其在人体中含量的变化常常是一些疾病的征兆,如高血压、白血病、肺炎等。酪氨酸(Tyr)是蛋白质的重要组合之一,对于维护营养均衡具有必不可少的作用,人体如果摄入酪氨酸失衡会引起某些疾病如白化病、黑尿症、抑郁症以及其他的一些心理疾病。黄嘌呤(XN)和次黄嘌呤(HXN)是嘌呤核苷酸分解代谢的中间产物,它们的含量变化异常时会引发痛风、黄嘌呤尿和高尿酸血等疾病。AA、DA、UA、Tyr、XN以及HXN这几种生物分子在传统玻碳电极上具有极高的且相互接近的氧化过电位,并且它们本身及自身的氧化产物会污染电极表面,从而极大地影响了检测的分析效果。针对以上问题,各种各样的修饰电极已经被制备并应用于AA、DA、UA、Tyr、XN和HXN的选择性或同时测定。由于聚合物修饰电极有较强的选择性、较好的稳定性、较高的重现性以及在电极表面的厚度可控制等优点而始终在电化学分析领域占有不可替代的一席之地。本文主要包括以下三方面的工作:1.采用循环伏安法(CV)将1H-咪唑-4-甲酸(HIMC)聚合修饰在玻碳电极(GCE)表面制备了聚1H-咪唑-4-甲酸修饰的玻碳电极(PHIMC/GCE)。实验结果表明,PHIMC/GCE不仅能很好地改善DA、UA和Tyr的电化学行为,而且能将其重叠的氧化峰分开,呈现出三个尖锐的氧化峰,故该修饰电极能够用于混合液中DA、UA和Tyr的同时测定。在优化的实验条件下,DA、UA和Tyr氧化峰电流与其浓度分别在0.5-40、2-310、8-420μmol L-1范围内呈线性关系,相关系数分别为0.9989、0.9951、0.9989,检出限(S/N=3)分别为0.03μmol L-1、0.30μmol L-1、0.10μmol L-1。DA、UA和Tyr在不同扫速下的电化学行为表明,三者的电极反应受吸附过程控制。将该修饰电极应用于人体尿样样本中DA、UA和Tyr的同时测定,结果显示令人满意。2.采用电化学法在滴涂纳米氧化锌(ZnO)的玻碳电极(GCE)上聚合修饰1H-咪唑-4-甲酸(HIMC),制得聚1H-咪唑-4-甲酸-纳米ZnO(PHIMC-ZnO)复合膜修饰的GCE(PHIMC-ZnO/GCE),并用扫描电子显微镜(SEM)及电化学方法对修饰电极的形貌和电化学特性进行了表征。利用循环伏安法(CV)和差分脉冲伏安法(DPV)研究了抗坏血酸(AA)、多巴胺(DA)和尿酸(UA)在该修饰电极上的电化学行为。结果表明:在pH值为7.0的磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,PHIMC-ZnO/GCE对AA、DA和UA均具有良好的电催化作用,与其在聚1H-咪唑-4-甲酸修饰的GCE(PHIMC/GCE)和纳米ZnO修饰的GCE(ZnO/GCE)上的电化学行为相比,三者的氧化峰电流均明显增加,峰电位差(ΔEpa)均为0.14V,可对三者进行同时检测。在优化的实验条件下,AA,DA和UA的物质的量浓度线性范围分别为80-1400,0.15-45.00和2-120μmol·L-1,相关系数分别为0.9980,0.9937和0.9983,检出限(S/N=3)分别为0.50,0.03和0.09μmol·L-1。AA、DA和UA在不同扫速下的电化学行为表明:AA,DA和UA在PHIMC-ZnO/GCE上的电极过程受吸附过程控制,将PHIMC-ZnO/GCE应用于尿样和血清中,AA,DA和UA的同时测定结果令人满意。3.采用电化学方法将1H-咪唑-4-甲酸聚合到羧基化的多壁碳纳米管(MWCNT)修饰到玻碳电极(GCE),制得PHIMC-MWCNT/GCE修饰电极,该修饰电极可用于UA、XN和HXN的同时测定。扫描电镜(SEM)、循环伏安法(CV)和差分脉冲伏安法(DPV)用于表征复合膜电极的表面形貌和电化学特征。由于MWCNT和PHIMC复合膜的特性使得在pH 7.0的磷酸缓冲溶液(PBS)中可同时测定UA、XN和HXN,并呈现较好的电催化活性、选择性和灵敏度。采用DPV法测定UA-XN和XN-HXN的阳极峰电位的差值分别为0.38V和0.35V。在最优条件下UA、XN和HXN的线性范围分别为2.0-600、1.0-340和2.0-500μmol L-1;检出限(S/N=3)分别为0.02μmol L-1、0.10μmol L-1、0.25μmol L-1。PHIMC-MWCNT/GCE修饰电极可用于在尿样和血清中UA、XN和HXN的同时测定并获得满意的结果。
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