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本研究中，我们提取肿瘤源性血管内皮细胞的冻融抗原，负载从人外周血扩增的DC。体外实验检测DC诱导的CTL对肿瘤血管源性内皮细胞的特异性杀伤效应；采用免疫重建的NOD/SCID鼠模型，接种负载抗原的DC疫苗，观测其对皮下肝癌的抑瘤效应。本研究的目的是利用DC打破机体对肿瘤血管内皮细胞的免疫耐受，诱导针对肿瘤血管内皮细胞的主动免疫反应，探索一种新的抗肿瘤血管治疗方法。
本研究采用胶原酶消化法分离HUVEC。用含人肝癌细胞株HepG2培养上清的条件培养液培养刺激HUVEC增殖，诱导形成肿瘤源性血管内皮细胞(Td-EC)。MTS法检测HepG2培养上清液促HUVEC增殖效应，ELISA法测定HepG2培养上清液中hVEGF含量，免疫组化法结合图像分析检测VEGFR-2在Td-EC的表达，RT-PCR法检测肿瘤内皮标记(TEM)在Td-EC的表达。
本文采用LymphoprepTM分离管分离肝癌患者的外周血单个核细胞，再利用贴壁法去除淋巴细胞，然后用含rhGM-CSF1×106U/L、rhIL-45×105U/L和10％胎牛血清的RPMI1640液培养贴壁细胞。每日在相差显微镜下观察细胞形态学变化，于第7天和14天收集细胞，用流式细胞仪检测DC的表型。肿瘤血管内皮细胞抗原负载的DC疫苗能抑制肿瘤血管的生成和肿瘤生长，说明疫苗已诱导产生了抗肿瘤血管的主动免疫反应。