FGF8在人和小鼠牙齿中亚型分析及其对牙齿发育的影响

来源 :福建师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lzhongyue
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哺乳动物的牙齿在发育的过程中,受到四大家族信号分子的调控。这四大家族包括:骨形成蛋白(BMP)、成纤维细胞生长因子(FGF)、刺猬蛋白家族(Hhs)和Wnt信号系统。FGF8是FGF信号通路中重要的一员。已有研究发现FGF8在人体中有四种亚型,分别是FGF8a、FGF8b、FGF8e和FGF8f;在小鼠中有八种亚型分别是FGF8a-h。人牙胚从牙板期到分化期FGF8都有强烈的表达,而小鼠磨牙牙胚在E12时FGF8表达很强烈,E13时表达开始下降,到了E14时不再表达。在人和小鼠的牙齿发育中,FGF8表达哪种亚型,其在人和小鼠牙齿发育中表达模式的不同对牙齿发育有什么影响,为了解决这些问题,进行了本实验。通过RT-PCR和测序比对分析,发现在人和小鼠牙齿的发育中都表达FGF8a亚型,两者表达的FGF8亚型一致。为了研究其对牙齿发育的影响,构建了pNL-IRES2-EGFP-FGF8a慢病毒载体。通过磷酸钙三质粒共转染293T细胞法生产慢病毒。通过FGF8a慢病毒感染小鼠E13.5磨牙间充质细胞来研究其作用。研究发现,感染了FGF8a慢病毒的牙胚,肾囊膜下移植8天后,牙齿发育到钟状期,与正常情况下发育到分泌期相比,牙齿发育被推迟。感染了FGF8a慢病毒的牙胚,肾囊膜下移植14天后,牙齿发育同样到了分泌期。但是牙齿结构上分析发现对照组的牙釉质相对较厚,实验组的牙釉质相对较薄;对照组的成釉细胞出现了退化现象,牙齿发育完全,而试验组的成釉细胞排列整齐,没有出现退化现象,牙齿发育被推迟。所以过表达FGF8a到了14天时候,FGF8a同样起到抑制牙齿发育的作用。
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