本研究分为四部分： 第一部分：自然流产孕鼠外周血、胸腺、脾脏和蜕膜中CD4+CD25+调节性T细胞的表达 目的：探讨CBA/J小鼠胚胎丢失与外周血、胸腺、脾脏和蜕膜中CD4+CD25+调节性T细胞表达水平的关系。 材料和方法： 试验动物分为三组： (1)非孕CBA/J雌鼠组； (2)正常妊娠模型CBA/J孕鼠组(CBA/J×BALB/c)； (3)流产模型CBA/J孕鼠组(CBA/J×DBA/2)。于妊娠第13天处死孕鼠，观察胚胎丢失率。采用流式细胞技术检测各组小鼠外周血、胸腺和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞表达水平；采用免疫组化和Western-blotting方法检测各组小鼠蜕膜中Foxp3分子表达水平；采用Real-timePCR方法检测各组小鼠蜕膜中Foxp3mRNA表达水平。 结果：正常妊娠模型孕鼠的外周血、胸腺和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞表达频率高于非孕雌鼠(P＜0.05)。正常妊娠模型孕鼠和非孕雌鼠的外周血、胸腺和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞表达频率均高于流产模型孕鼠(P＜0.05或P＜0.01)。正常妊娠模型孕鼠蜕膜中Foxp3分子、Foxp3mRNA表达水平明显高于流产模型孕鼠(P＜0.01)，胚胎丢失率明显低于流产模型孕鼠(P＜0.01)。 结论：正常孕鼠体内发生了CD4+CD25+调节性T细胞扩增；流产孕鼠体内CD4+CD25+调节性T细胞扩增障碍，可能与胚胎丢失有关。 第二部分：抗CD25抗体清除CD4+CD25+调节性T细胞对正常孕鼠妊娠结局的影响 目的：探讨使用抗CD25抗体清除CBA/J孕鼠体内内源性CD4+CD25+调节性T细胞，是否会导致胚胎丢失的发生。 材料和方法： 试验动物分为三组： (1)试验组：正常妊娠模型CBA/J孕鼠，妊娠第0天腹腔注射大鼠抗小鼠CD25抗体； (2)免疫球蛋白对照组：正常妊娠模型CBA/J孕鼠，妊娠第0天腹腔注射等剂量大鼠IgGl； (3)生理盐水对照组：正常妊娠模型CBA/J孕鼠，妊娠第0天腹腔注射等剂量生理盐水。实验检测方法和指标同第一部分。 结果：与免疫球蛋白对照组和生理盐水对照组比较，试验组孕鼠外周血、胸腺和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞表达频率，蜕膜中Foxp3分子和Foxp3mRNA表达水平均显著降低(P＜0.01)，胚胎丢失率明显升高(P＜0.01)。免疫球蛋白对照组和生理盐水对照组孕鼠外周血、胸腺和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞表达频率，蜕膜中Foxp3分子和Foxp3mRNA表达水平，以及胚胎丢失率之间均无统计学差异(P＞0.05)。 结论：使用抗CD25抗体清除孕鼠体内CD4+CD25+调节性T细胞可导致胚胎丢失。孕鼠体内缺乏CD4+CD25+调节性T细胞与胚胎丢失有关。 第三部分：过继性转移CD4+CD25+调节性T细胞对自然流产孕鼠妊娠结局的影响 目的：探讨父系抗原致敏的CD4+CD25+调节性T细胞是否具有防止胚胎丢失的作用。 材料和方法： 采取正常妊娠CBA/J孕鼠的脾脏，MACS免疫磁珠从脾脏中分选CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25T细胞，流式细胞技术检测分选细胞的纯度。将分选细胞于妊娠第0天经尾静脉注射给流产模型CBA/J孕鼠。试验动物分为三组： (1)试验组：流产模型CBA/J孕鼠，注射CD4+CD25+T细胞； (2)非调节性T细胞对照组：流产模型CBA/J孕鼠，注射等剂量CD4+CD25-T细胞； (3)生理盐水对照组：流产模型CBA/J孕鼠，注射等剂量生理盐水。实验检测方法和指标同第一部分。 结果：与非调节性T细胞对照组和生理盐水对照组比较，试验组孕鼠外周血、胸腺和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞表达频率无统计学差异(P＞0.05)，蜕膜中Foxp3分子和Foxp3mRNA表达水平轻度升高，但无统计学差异(P＞0.05)，胚胎丢失率降低(P＜0.05)。非调节性T细胞对照组和生理盐水对照组孕鼠外周血、胸腺和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞表达频率，蜕膜中Foxp3分子和Foxp3mRNA表达水平，以及胚胎丢失率之间均无统计学差异(P＞0.05)。 结论：向流产孕鼠过继性转移来源于正常妊娠孕鼠脾脏的CD4+CD25+调节性T细胞，可有效防止胚胎丢失。父系抗原致敏的CD4+CD25+调节性T细胞对正常妊娠具有保护作用。 第四部分：过继性转移TGF-β诱导CD4+CD25+调节性T细胞对自然流产孕鼠妊娠结局的影响 目的：探讨过继性转移TGF-β诱导生成的父系抗原致敏的CD4+CD25+调节性T细胞是否具有防止胚胎丢失的作用。 材料和方法： 采取正常妊娠CBA/J孕鼠的脾脏，MACS免疫磁珠从脾脏中分选CD4+CD25T细胞。采用TGF-β、CD3、CD28和IL-2诱导CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+T细胞。流式细胞技术检测诱导细胞的纯度。将诱导细胞于妊娠第0天经尾静脉注射给流产模型CBA/J孕鼠。试验动物分为四组： (1)试验组一：流产模型CBA/J孕鼠，注射经TGF-β诱导转化48小时的CD4+CD25+T细胞； (2)试验组二：流产模型CBA/J孕鼠，注射经TGF-β诱导转化144小时的CD4+CD25+T细胞； (3)非调节性T细胞对照组：流产模型CBA/J孕鼠，注射等剂量CD4+CD25-T细胞； (4)生理盐水对照组：流产模型CBA/J孕鼠，注射等剂量生理盐水。实验检测方法和指标同第一部分。 结果：与非调节性T细胞对照组和生理盐水对照组比较，试验组一和试验组二孕鼠外周血、胸腺和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞表达频率无统计学差异(P＞0.05)，蜕膜中Foxp3分子表达水平无统计学差异(P＞0.05)，Foxp3mRNA表达水平略有升高，但无统计学差异(P＞0.05)，胚胎丢失率降低(P＜0.05)。试验组一和试验组二孕鼠外周血、胸腺和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞表达频率，蜕膜中Foxp3分子和Foxp3mRNA表达水平，以及胚胎丢失率之间均无统计学差异(P＞0.05)。非调节性T细胞对照组和生理盐水对照组孕鼠外周血、胸腺和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞表达频率，蜕膜中Foxp3分子和Foxp3mRNA表达水平，以及胚胎丢失率之间均无统计学差异(P＞0.05)。 结论：向流产孕鼠过继性转移TGF-β诱导生成的CD4+CD25+调节性T细胞，可有效防止胚胎丢失。TGF-β诱导生成的父系抗原致敏的CD4+CD25+调节性T细胞对正常妊娠具有保护作用。