研究目的:基于网络药理学研究通窍活血汤治疗VD的潜在药效物质、核心配伍组合及生物学机制。研究方法:(1)通过检索TCMSP和TCMID获得通窍活血汤各药物化合物成分,利用FAF-Drugs4数据库进行ADME-Tox评估及筛选,筛选出类药性参数较好的化合物成分作为潜在药效分子,并通过SwissADME网站评估通窍活血汤各药物的肠道吸收能力和血-脑屏障渗透能力。(2)通过TCMSP和SwissTargetPrediction获取通窍活血汤各药物潜在药效分子作用靶点,利用GeneCard、OMIM和DisGeNET三个疾病数据库获取VD相关靶点。将潜在药效分子靶点与疾病相关靶点进行匹配获取潜在药效分子-疾病作用靶点,构建潜在药效分子-作用靶点、药物-靶点-疾病网络,进行通窍活血汤治疗VD潜在药效物质的预测和核心配伍组合的初探。(3)利用Cytoscape3.7.1软件BisoGenet插件对潜在药效分子-疾病作用靶点进行PPI网络的构建,同时利用CytoNCA插件对PPI网络中靶点进行拓扑学分析,获取核心网络靶点。运用DAVIAD数据库分别对核心网络靶点进行GO富集分析和KEGG通路富集分析,初步分析和探索核心网络靶点的生物学意义和可能参与的信号通路,进而解析通窍活血汤治疗VD可能的生物学机制。研究结果:(1)通窍活血汤所有药物成分经过ADME-Tox类药性参数筛选后,分别获得麝香潜在药效分子30个、桃仁潜在药效分子18个、红花潜在药效分子58个、川芎潜在药效分子90个、赤芍潜在药效分子32个、生姜潜在药效分子116、大枣潜在药效分子28个、老葱潜在药效分子43个。运用SwissADME评估发现,通窍活血汤各药物具有较好的肠道吸收能力和血-脑屏障渗透能力,其中红花、川芎、赤芍、大枣更偏于肠道吸收,麝香、生姜、老葱在肠道吸收和血-脑屏障的渗透能力方面均较好。(2)将药物靶点与疾病靶点匹配后,共获取285个潜在药效分子-疾病作用靶点。其中通窍组中麝香靶点104个(占全部靶点36.5%)、老葱靶点71个(占全部靶点24.9%),且麝香-老葱共有靶点19个。活血化瘀组中红花作用靶点166个(占全部靶点的58.2%),赤芍作用靶点87个(占全部靶点的30.5%),川芎作用靶点64个(占全部靶点的22.5%),桃仁作用靶点28个(占全部靶点的9.8%)。调和营卫组中大枣作用靶点149个(占全部靶点的52.3%),生姜作用靶点90个(占全部靶点的31.6%)。(3)通过构建和分析潜在药效分子-作用靶点网络发现,通窍组治疗VD的主要潜在药效分子为:山奈酚、丹皮酚、丁基羟基甲苯、睾酮、正荷叶碱等。活血化瘀组治疗VD的主要潜在药效分子为:槲皮素、黄芩素、芹菜素、咖啡酸、山奈酚、木犀草素等。调和营卫组治疗VD的主要潜在药效分子为槲皮素、丁香酚、6-姜酚、荷叶碱、光千金藤碱、异丁香酚等。(4)通过构建和分析PPI网络发现通窍活血汤治疗VD具有多成分、多靶点的协同增效作用特点,其中 APP,NTRK1,CUL3,EGFR,XPO1,TP53,MCM2,ESR1,UBC,FN1等靶蛋白可能是通窍活血汤治疗VD的核心靶点。GO分析显示通窍活血汤可能通过调控端粒组织、依赖于DNA复制的核小体组装、rDNA染色质沉默、蛋白质异四聚、翻译起始、病毒转录、rRNA加工、端粒封顶等多种生物学过程发挥治疗VD的作用。KEGG通路分析表明通窍活血汤可能通过影响MAPK信号通路、TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路、NF-KB信号通路、胰岛素信号通路、cAMP信号通路等发挥抗痴呆作用。结论:(1)通窍活血汤治疗VD的潜在药效物质可能为槲皮素、山奈酚、丹皮酚、睾酮、黄芩素、芹菜素、咖啡酸、木犀草素、丁香酚、6-姜酚等,且以上成分均已被证实具有抗痴呆作用,为临床VD药物的开发提供一定的依据。(2)通窍活血汤治疗VD的核心配伍组合可能是麝香-红花-大枣,为临床运用通窍活血汤或通窍活血法治疗VD提供一定的参考。(3)通窍活血汤治疗VD具有多靶点、多途径的作用特点,其抗痴呆的生物学机制主要与MAPK信号通路、TNF信号通路、PI3K-Akt信号通路、mTOR信号通路、NF-KB信号通路、胰岛素信号通路、cAMP信号通路等有关,为临床运用通窍活血汤治疗VD提供一定的生物学基础,也为下一步实验研究提供方向和依据。