粪肠球菌脂磷壁酸及TLR2激动剂对MG-63细胞NF-κB表达影响的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:badgod
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目的:体外研究粪肠球菌脂磷壁酸及TLR2激动剂对人成骨肉瘤MG-63细胞中NF-κB表达水平的影响。方法:10μg/ml TLR2激动剂Pam3CSK4作用于体外培养的MG-63细胞48h后,以100μg/ml粪肠球菌脂磷壁酸分别处理24h和48h,对照组MG-63细胞未经任何处理,分别培养24h和48h。以细胞裂解液提取细胞总蛋白并进行各个样本的蛋白质定量。以蛋白印迹技术检测粪肠球菌脂磷壁酸和Pam3CSK4作用于MG-63细胞不同时间后NF-κB表达水平的变化。用Bio-Rad图像分析系统对目的条带进行扫描成像,应用GelPro软件进行条带分析,将各组NF-κB条带的光密度值分别与内参条带的光密度值进行比较,以二者的比值代表目的蛋白相对表达水平。结果:1.粪肠球菌脂磷壁酸处理MG-63细胞24h后,实验组NF-κB的表达水平高于对照组,差异具有统计学意义;但Pam3CSK4对NF-κB的表达水平没有明显影响,粪肠球菌脂磷壁酸/Pam3CSK4组和粪肠球菌脂磷壁酸组的差异无统计学意义。2.粪肠球菌脂磷壁酸处理MG-63细胞48h后,实验组NF-κB的表达水平依然高于对照组,差异具有统计学意义;且Pam3CSK4对NF-κB的影响也逐渐增大,粪肠球菌脂磷壁酸/Pam3CSK4组和粪肠球菌脂磷壁酸组NF-κB的表达差异有统计学意义。3.粪肠球菌脂磷壁酸/Pam3CSK4组MG-63细胞NF-κB的表达水平在48h较24h增高,差异有统计学意义。但粪肠球菌脂磷壁酸组NF-κB的表达受时间的影响较小,两个时间点的表达水平无明显差异。结论:1.粪肠球菌脂磷壁酸可上调MG-63细胞NF-κB的表达水平。2.粪肠球菌脂磷壁酸和Pam3CSK4联合应用可上调MG-63细胞NF-κB的表达水平。
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