柄海鞘(Styela clava)生物碱类物质的分离纯化及抗肿瘤活性研究

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目前,国外对海洋被囊动物海鞘类生理活性物质的研究正处于高速发展阶段,但是关于从柄海鞘的鞘囊或鞘体中提取出高效的抗肿瘤药物的研究至今尚未见报道。国内学者对海鞘的研究仅有零星报道,多数未涉及到生理活性问题。我国海鞘资源丰富,种类多分布广,山东沿海柄海鞘资源极为丰富,与国外相比,国内海鞘资源不仅没有得到有效的开发,而且困扰着渔业和航海业的发展,应当引起人们的极大关注。本文从以下几方面对柄海鞘鞘体内生物碱进行了初步研究。首先,将采集到的新鲜柄海鞘冷冻保存,解冻后剥离鞘囊,将鞘体组织匀浆,冷冻干燥,将鞘体粉末用氨水湿润,氯仿浸提,浓缩氯仿浸提液,用盐酸酸化后乙醚萃取除掉脂溶性杂质,氢氧化钠碱化后用氯仿重新萃取,得到橙黄色的氯仿萃取液,浓缩蒸干得到脂溶性总生物碱。用10%氨水浸提鞘体残渣,盐酸酸化后,离心弃沉淀,向酸化溶液中加入饱和雷氏铵盐溶液,离心弃上清,丙酮溶解雷氏生物碱复盐沉淀,水洗重新沉淀。丙酮溶解沉淀后过732强酸H型阳离子交换树脂,10%氨水洗脱,浓缩蒸干洗脱液,盐酸酸化后过Sephadex LH-20凝胶柱层析,收集合并各组分。用半制备HPLC、结晶和重结晶、Sephadex LH-20,得到物质B-a、C-a、E-a。其次,对分离到的B-a用EI源质谱分析测试,由于尚含有杂质,无法确定B-a的具体结构;结合C-a的ESI源质谱、红外和X-单晶
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