小柴胡汤含药血清诱导人HepG2细胞凋亡和自噬的实验研究

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目的:研究凋亡与自噬在小柴胡汤抑制HepG2细胞生长过程中的关系。材料与方法:在这项研究中,采用血清药理学方法来研究凋亡与自噬的相互关系。采用不同浓度的小柴胡汤含药血清在不同的时间点来处理HepG2细胞,并用MTT检测和肿瘤细胞形态观察的方法来评价抑制效果。在不同时间点通过检测线粒体膜电位的变化(Rh123染色)、核形态的改变(hoechst33342染色)及凋亡相关蛋白cytochrome c的表达,来研究小柴胡汤含药血清的促凋亡作用。为了进一步研究凋亡与自噬在小柴胡汤含药血清抗HepG2细胞中的相互作用,本实验采用了caspase-3抑制剂来抑制凋亡,通过自噬泡的形成(MDC染色)及自噬相关蛋白(Beclin-1, LC3)的表达的检测,来观察抑制凋亡后对自噬的影响。结果:1.小柴胡汤能够抑制肝癌细胞HepG2生长。2.实验期间小柴胡汤能够明显的引起HepG2线粒体膜电位和细胞核形态的改变及cytochrome c的表达增加。3.使用凋亡抑制剂以后,MDC染色及蛋白检测的结果提示,与单纯用药组相比,自噬效果减弱。结论:1.凋亡始终存在于小柴胡汤抑制HepG2细胞生长的过程中,是小柴胡汤抗肿瘤的重要机制之一。2.小柴胡汤抑制HepG2细胞生长的过程中,凋亡促进了自噬的发生。
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