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[目的]目前,关于鱼类能在不同盐度环境下生存机制的研究主要集中在发育成熟的鱼上,而对于生命始源-胚胎的适应性调节研究较少。本论文选取河口鱼类中代表性物种大银鱼为研究对象,首次从转录组角度研究大银鱼胚胎在广盐梯度环境下其适应的分子机制,探索大银鱼胚胎渗透调节特性,为进一步探讨水生物通过自身调节适应环境奠定理论基础,对了解物种生存和分布格局具有重要科学意义。[方法1将采集的新排出大银鱼随机分成两组,依次为：对照组(淡水孵化组)、处理组(15‰盐水孵化组),每组设立三个组内平行,分别是对照组1(ctrl-1)、对照组2(ctr l-2)及对照组3(ctrl-3),盐处理组1(salt-1)、盐处理组2(salt-2)及盐处理组3(salt-3),同等条件下孵化。用第二代测序技术对大银鱼胚胎转录组进行测序,依据Phrap算法使用BLAST、GO-Term Finder软件得到其基因转录的详细信息,进一步数据分析后获得本实验的靶向基因,应用Real-Time PCR方法验证部分靶向基因,从基因转录组水平上深入揭示盐适应性调节机理。[结果]1.在对大银鱼胚胎转录组测序中,测序产量统计的Total Clean Nucleotides对照组平均是473×107nt,低盐度处理组平均是456×107nt。拼接获得了100600个单基因序列,在Nr中有60129个Unigene被注释。预测编码蛋白框共计62434个序列。与对照组相比,差异基因占转录组的比例是9.8%。通过Nr注释,发现目前与大银鱼亲缘关系较近的物种包括是罗非鱼、斑马鱼和青鳉等。2.首次获得大银鱼胚胎盐调节相关靶基因注释信息,且经Real-Time PCR实验对部分靶基因进行了验证。结果显示,盐处理可使大银鱼胚胎NKA (P<0.01)、NKCC、 AQP8、Hsp70显著上升(P<0.05),分别升高了4.6倍、3.7倍、4.3倍和3.1倍；使Kir显著下降(P<0.05),下降了39%。其他与盐渗透调节有关的基因有相应变化趋势。[结论]此次实验结果表明,在一定盐度水环境处理下,可使大银鱼胚胎有关渗透适应的众多转录本表达水平发生显著改变,包括影响Na+离子通道,H+离子通道,K+离子通道等,这些变化可能参与了胚胎的渗透调节,部分构成了大银鱼广盐适应性的分子基础。同时发现在现有的基因组数据库中,大银鱼基因序列中与罗非鱼相关的基因所占比例最高为33.6%,相对于其它物种两者间可能存在较大的亲缘关系。