论文部分内容阅读
背景:心力衰竭患者合并抑郁症的风险是普通人的2-3倍。临床常用的抗抑郁药物如三环类抗抑郁药(TCAs)和选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs),会增加心衰患者心血管事件发生率和全因死亡率。安非他酮(BUP)为新型抗抑郁药物,主要作用机制是阻滞多巴胺再摄取以达到治疗目的,优点是对心脑血管系统没有明显影响,临床用于重度抑郁症的治疗。地高辛(DIG)是强心苷类药物,临床上常用于治疗心力衰竭,该药治疗窗狭窄,体内暴露量出现小幅度波动,都有可能导致临床治疗效果不佳或使心血管不良反应风险显著增加。我们前期研究发现,在大鼠体内,BUP使DIG肾脏清除率(CLr)显著增加51%,但对系统清除率没有影响。有机阴离子转运多肽(OATP)4C1的和P-糖蛋白(P-gp)参与DIG肾脏排泄。临床试验偶然观察单剂量口服BUP,24 h后给予DIG,DIG CLr增加80%,同时血药浓度时间曲线下面积降低40%。这是罕见的导致地高辛CLr增加,并且血药浓度减少的药物相互作用(DDI)。由于1.前述BUP交叉给药的临床实验设计无法有效评估DIG-BUP DDI的程度;2.尚不清楚BUP长期给药对DIG体内处置过程的影响;3.大鼠Oatp4c1表达位置同人OATP4C1相反,不适合作为研究该DDI的动物模型,因此,有必要从药动学的角度进一步全面评价该DDI并揭示其临床风险。目的:建立同时测定食蟹猴血浆和尿液中BUP、羟基安非他酮(HBUP)、赤式羟基安非他酮(EBUP)、苏式羟基安非他酮(TBUP)、DIG浓度的UPLC-MS/MS方法,然后利用食蟹猴体内DDI模型,系统研究BUP及其活性代谢产物对DIG药物代谢动力学的影响,同时评估该DDI发生的部位、程度和临床风险,为精准医疗和个体化用药提供实验数据与理论支持。方法:1.建立同时测定食蟹猴血浆中BUP、HBUP、EBUP、TBUP、DIG浓度的UPLC-MS/MS方法。2.建立同时测定食蟹猴尿液中BUP、HBUP、EBUP、TBUP、DIG浓度的UPLC-MS/MS方法。3.采用三周期、随机实验设计,以食蟹猴为动物模型,考查BUP及其代谢产物对DIG体内处置过程的影响。第一周期(对照),食蟹猴单剂量静脉滴注DIG(0.1 mg/kg)或口服DIG(0.2 mg/kg)。第二周期(单剂量给药),食蟹猴单剂量静脉滴注BUP(1.5 mg/kg),同时分别单剂量静脉滴注(0.1 mg/kg)或口服DIG(0.2 mg/kg)。第三周期(多剂量给药),食蟹猴首先连续12天每天口服给药BUP(7.72 mg/kg),然后单剂量静脉滴注BUP(1.5 mg/kg),同时分别单剂量静脉滴注(0.1 mg/kg)或口服DIG(0.2 mg/kg)。4.超滤法测定DIG、BUP及其活性代谢产物的血浆蛋白结合率。肌氨酸氧化酶法(酶联法)测定血浆和尿液肌酐。UPLC-MS/MS测定DIG、BUP及其活性代谢产物在血浆和尿液中的浓度。Phoenix?Win Nonlin?version 6.4分析药动学参数。结果:1.血浆标准曲线在0.2-1000 ng/m L(BUP/HBUP),0.2-50 ng/m L(EBUP/TBUP),0.25-100 ng/m L(DIG)范围内线性良好(r≥0.9950),批内批间精密度均小于10.69%,绝对回收率为83.8%-104.2%,基质效应小于13.1%。2.尿液标准曲线在0.2-1000 ng/mL(BUP/HBUP),0.2-50 ng/mL(EBUP/TBUP),0.25-100 ng/m L(DIG)范围内线性良好(r≥0.9940),批内批间精密度均小于11.58%,绝对回收率为80.4%-99.1%,基质效应小于10.9%。3.单剂量给药BUP,静注DIG CLr 0-48h增加了1倍,但是不影响静注和口服DIG的血药浓度和系统暴露量。多剂量给药BUP,显著增加口服DIG的肾脏清除率(CLr 0-48h)、总清除率(CLtot 0-48h)、非肾清除率(CLnr 0-48h),减少其血浆浓度和暴露量。BUP及其活性代谢物不改变DIG肌酐清除率和血浆游离分数。结论:1.建立了简便的蛋白沉淀法联合UPLC-MS/MS测定食蟹猴血浆和尿液中BUP、HBUP、EBUP、TBUP、DIG的方法,并转化运用于药动学研究。该方法稳定性好,选择性高,使用常规的分析色谱柱,操作简便、快速、成本低。经方法学验证,符合生物样品分析的要求。2.单剂量给药BUP对DIG药动学的影响有限,多剂量给药BUP显著改变DIG的体内处置过程。BUP长期给药后DIG CLnr 0-48h显著增加是DIG系统暴露量下降的主导因素,更具有临床意义。3.HF患者最初合并使用BUP抗抑郁,可能会由于DIG血药浓度过低而导致DIG疗效不佳,而BUP突然停药则容易使DIG体内暴露量突然升高,增加心血管不良反应的风险。DIG、BUP个体化给药方案和剂量调整将有助于HF患者的抗抑郁治疗,促进临床安全合理用药。