目的:乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤。对于局部晚期乳腺癌来说新辅助化疗不仅可以改善达到病理学完全缓解（pCR）患者的预后,且可以使原本不能进行手术的患者获得手术机会。乳腺MRI作为评价新辅助化疗疗效的一种有效手段得到广泛认可。但对于MRI下达到影像学完全缓解（rCR）的患者能否准确评价pCR,且这种rCR能否预测患者的预后还不得而知。另外,对于经新辅助化疗后未能达到pCR的患者,尤其是预后评价较差的患者术后的强化治疗已经得到认可。然而对于三阴性乳腺癌术后的强化治疗手段还比较单一,且缺乏治疗的靶点。众所周知,核因子κB受体活化因子配体（RANKL）是肿瘤坏死因子家族中的一员,它与不同细胞表面的核因子κB受体活化因子（RANK）相结合,在肿瘤发生、迁移以及免疫调节中均起到一定的作用。因此,抑制RANKL/RANK信号通路可能是阻止肿瘤发生和转移的有效治疗方法。我们希望应用新近开发出针对RANKL的小分子靶向药CCR1101来了解其对三阴性乳腺癌细胞的影响以及其作用机制,期望其可以为三阴性乳腺癌提供新的治疗方式。方法:1.回顾性分析了2015年8月至2018年12月接受4个及以上新辅助化疗的患者的乳腺MRI数据。在单变量和多变量因素下,分析与rCR和pCR相关的临床病理因素。分析不同肿瘤亚型的MRI诊断准确性及rCR与pCR的相关性。并应用K-M生存分析法对患者的预后进行评估。2.选择了MDA-MB-231、MDA-MB-436、BT549、HCC1937、SUM149、SUM1315这6种三阴性乳腺癌细胞系,采用实时RT-PCR检测不同细胞系RANKL和RANK的mRNA表达水平。应用细胞增殖MTT法及3D细胞培养评估和观察RANKL小分子抑制剂对高表达和低表达RANKL的BLBC细胞系增殖情况的影响。应用Transwell法和细胞划痕实验对肿瘤细胞的迁移情况进行观察评估,同时明确小分子抑制剂对迁移作用的影响。采用NF-κB转染法和Western blotting法研究RANKL小分子抑制剂对三阴性乳腺癌细胞的作用所影响的信号通路。结果:1.177名含有完整MRI资料的新辅助化疗的乳腺癌患者达到了研究的入选标准。在这些患者中有18位（10.2%）达到了rCR,有21位（11.9%）达到了pCR。对于整体人群来讲,MRI诊断的rCR与pCR显著相关,Spearman相关系数为0.686。敏感性、特异性、准确性、pCR预测值（PPV）和非pCR预测值（NPV）分别估计为66.67%、97.44%、93.79%、77.78%和95.60%。在Luminal B高Ki67%（P<0.001）,HER2阳性（P=0.0035）和三阴性（P<0.001）亚型中发现rCR和pCR之间的统计学差异具有显著相关性。在单因素分析中,与rCR和pCR均显著相关的肿瘤特征是小肿瘤、淋巴结转移（LNM）阴性、临床早期、高组织学分级、高Ki67%指数和不同的分子分型。在多因素logistic回归分析中,rCR与3级肿瘤（P=0.013）、Ki67%≥40%（P<0.000）和I期肿瘤（P=0.006）相关。但是,3级肿瘤（P=0.001）、三阴性乳腺癌（TNBC）以及临床I和II期肿瘤（P=0.003;P=0.030）与pCR呈独立相关。另外,在中位随访28个月后,177例患者中复发46例,死亡29例。在总体队列中,RFS和OS在3年时的发生率分别为78.5%和84.9%。达到pCR的患者复发或死亡的风险与未达到pCR患者相比显著降低（3年RFS分别为96.4%和76.6%,P=0.041;OS分别为96.4%和86.3%,P=0.037）。达到rCR的患者复发或死亡的风险显著降低（3年RFS分别为94.4%和78.5%,P=0.046;OS分别为94.4%和87.1%,P=0.031）。不考虑肿瘤的分子分型,既达到rCR又达到pCR的患者预后最佳（RFS及OS均为0事件）。而既未达到rCR又未达到pCR的患者预后最差。虽然RFS差异并无统计学意义（P>0.05）,但趋势明显;而总生存差异具有明显统计学差异（P=0.049）。应用MRI进行影像学疗效评价同样可以预测复发的风险:NAC后rPR的患者预后比rCR患者差（HR 1.68,95%CI1.17-2.39,P=0.003）,但预后比疗效评价为稳定或进展的患者好（HR 0.31,95%CI0.13-0.69,P=0.003）。2.不同的BLBC细胞系可以在体外表达不同水平的RANKL和RANK,MDA-MB-231细胞系具有最高的RANK mRNA表达水平,而MDA-MB-436细胞系则表达水平最低。从RANKL mRNA表达水平上来看,SUM1315细胞系的表达水平最高,而MDA-MB-231细胞最低。然而不同的RANKL或RANK表达水平不会对细胞增殖产生任何影响,且靶向RANKL的小分子抑制剂也不能起到抑制增殖的作用。但在类似体内环境的3D培养却能观察出抑制增殖的作用。RANKL可以诱导RANK高表达MDA-MB-231细胞迁移,该迁移可以被CCR1101抑制。RANKL诱导的乳腺癌细胞迁移是通过NF-κB介导,且可以被CCR1101抑制。尚未发现明确证据证明该迁移作用与JNK、ERK、Akt通路相关。结论:1.MRI下影像学完全缓解能够准确预测病理学完全缓解,并且能起到与pCR一样的预测患者预后作用。2.针对RANKL的小分子靶向抑制剂能够通过RANKL/RANK-NF-κB信号通路抑制三阴性乳腺癌细胞的迁移。3.对于新辅助化疗的乳腺癌患者应用乳腺MRI进行影像学疗效评价结合病理学疗效评价,对于预后差的患者,尤其是强化治疗手段较少的三阴性乳腺癌患者应用靶向RANKL的小分子抑制剂是一种可行的手段。