腹腔镜气腹对大鼠肝癌模型肿瘤体积、细胞凋亡及增殖影响的研究

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目的:利用建立的移植性大鼠肝癌模型,评估及比较不同种类的膨腹气体原对大鼠肝癌模型肿瘤体积、细胞凋亡及增殖的影响,以此探讨气腹对肿瘤的生长和转移的影响。方法:1)建立移植性大鼠肝癌模型:将细胞株Walker256注射到雄性Wistar 大鼠(60-80g)的四肢皮下,6 天后将皮下出现的肿块取出,再将肿块(体积约1×1×1mm3)种植到大鼠的肝脏内。2)手术干预:模型建立后10 天,将总共100 只大鼠(体重200-250g)随机分为5 组:二氧化碳组(CO2)、氦气组(He)、氮气组(N2)、开腹组及单纯麻醉组,每组各20只。气腹组用穿刺管将不同气体输入腹腔,压力8mmHg,持续1 小时;开腹组在腹壁正中从剑突下至耻骨联合上做一切口,暴露腹腔,持续1 小时后缝合;单纯麻醉组只插入穿刺管,持续1 小时。3)检测肿瘤体积、细胞凋亡及增殖:在术后1 天处死各组存活鼠的一半,另一半于术后7 天处死;取出肿瘤,测量体积,之后制成切片,分别采用TUNEL 法检测肿瘤细胞凋亡,免疫组织化学方法标记cyclin-PCNA 来检测增殖指数。结果:术后1 天和7 天,CO2 组、He 组、N2组、开腹组及单纯麻醉组肿瘤体积比较无统计学显著差异(Kruskal-Wallis test: χ2=2.642 P=0.619;χ2=0.209 P=0.995);增殖指数比较也无统计学显著差异(ANOVA:F = 0.554, P=0.697;F=1.236, P=0.323);术后1天,肿瘤细胞凋亡比较无统计学显著差异(ANOVA:F=0.413, P=0.798);而术后7 天,凋亡比较有统计学显著差异(F=5.698, P=0.002)。结论:CO2气腹并没有促进大鼠肝癌模型肿瘤的生长及改变肿瘤细胞的生物学特征;He 气腹有诱导肿瘤凋亡的作用。
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