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研究目的:1.研究初发慢性髓细胞白血病(CML)、伊马替尼治疗后CML、伊马替尼耐药CML患者CD33~+细胞内mTOR/S6信号转导途径及RAPA对其影响。2.研究伊马替尼及雷帕霉素(RAPA)对CML患者T细胞免疫功能的影响。方法:1.以缺铁性贫血患者为正常对照组,用流式细胞仪检测初发CML组患者骨髓CD33~+细胞胞内p-mTOR、p-S6蛋白含量及CD3~+、CD3~+CD8-、CD3~+CD8~+T淋巴细胞内IFN-γ表达;体外加用RAPA后细胞内p-mTOR、p-S6和INF-γ的变化。2.流式细胞仪检测伊马替尼治疗、羟基脲~+干扰素(HU~+IFN)治疗CML慢性期患者,骨髓CD33~+细胞内p-mTOR、p-S6蛋白含量及CD3~+、CD3~+CD8-、CD3~+CD8~+T淋巴细胞内IFN-γ表达;体外加用RAPA后细胞内p-mTOR、p-S6和INF-γ的变化。3.流式细胞仪检测伊马替尼耐药CML患者骨髓CD33~+细胞内p-mTOR、p-S6蛋白含量及CD3~+、CD3~+CD8-、CD3~+CD8~+T淋巴细胞内IFN-γ表达;体外加用RAPA后细胞内p-mTOR、p-S6和INF-γ的变化。结果:1.初发CML组CD33~+细胞内p-mTOR、p-S6含量高于正常对照组[(9.53±7.87)%vs(2.43±2.54)%;P<0.05] [(7.64±3.17)%vs(1.21±1.44)%; P<0.05],加用RAPA后能显著降低p-mTOR、p-S6含量[(9.53±7.87)%vs(3.64±3.29)%;P<0.05] [(7.64±3.17)%vs(1.85±2.51)%; P<0.05]。2.初发CML组CD3~+、CD3~+CD8-、CD3~+CD8~+T淋巴细胞内INF-γ的表达水平与正常对照组同类细胞内INF-γ表达没有显著性差异,([11.08±12.05)%v(s13.31±8.33)%; P>0.05]、[(8.66±6.34)%vs(10.39±5.59)%; P>0.05]、[(15.29±10.01)%vs(17.77±11.61)%;P>0.05];RAPA能够降低初发CML组淋巴细胞内IFN-γ的表达,([11.08±12.05)%v(s5.77±5.91)%;P<0.05]、([8.66±6.34)%v(s4.83±5.18)%;P<0.05、[(15.29±10.01)%vs(9.74±8.85)%;P<0.05]。3.伊马替尼治疗组骨髓CD33~+细胞内p-mTOR含量与初发CML组没有显著性差异[(10.61±13.7)%vs(9.53±7.87)%;P>0.05];较HU+IFN治疗组显著增高,[(10.61±13.70)%vs(3.67±4.59)%;P<0.05];RAPA能降低伊马替尼治疗组CD33~+细胞内p-mTOR含量,[(10.61±13.70)%vs(3.86±8.99)%;P<0.05]。以初发CML组CD33~+细胞内p-mTOR 95%可信限为界,伊马替尼治疗组有25.7%的CD33~+细胞内p-mTOR增高,RAPA能降低其含量,[(29.89±14.89)%vs(8.26±15.45)%;P<0.05]。HU~+IFN组CD33~+细胞内p-mTOR含量较初发CML组显著降低,[(3.67±4.59)%vs(9.53±7.87)%; P<0.05]。4.伊马替尼治疗组CD33~+细胞内p-S6含量较初发CML组CD33~+细胞内p-S6没有显著性差异,[(19.65±30.19)%vs(7.64±3.17)%;P>0.05]。HU~+IFN组CD33~+细胞内p-S6含量较初发CML组CD33~+细胞内p-S6显著降低,[(2.95±2.70)%vs(7.64±3.17)%;P<0.05]。以初发CML组CD33~+细胞内p-S6 95%可信限为界,伊马替尼治疗组有25.7%CD33~+细胞内p-S6含量增高,RAPA能降低此p-S6含量,[(44.48±19.43)%vs(10.53±12.39)%; P<0.05]。5.伊马替尼治疗组CD3~+、CD3~+CD8-、CD3~+CD8~+T淋巴细胞内INF-γ的表达显著高于初发CML组:[(17.28±12.71)% vs(11.08±12.05)%;P<0.05]、[(13.06±9.34)% vs(8.66±6.34)%;P<0.05]、[(22.50±16.70)% vs(15.29±10.01)%;P<0.05],RAPA不能降低T细胞内INF-γ的表达,[(17.28±12.71)%vs(13.41±11.29)%;P>0.05]、[(13.06±9.34)%vs(10.06±8.21)%;P>0.05]、[(22.50±16.70)%vs(20.45±13.22)%;P>0.05]。伊马替尼治疗组CD3~+、CD3~+CD8-、CD3~+CD8~+T淋巴细胞内INF-γ的表达显著高于HU+IFN治疗组,[(17.28±12.71)%vs(10.05±8.23)%; P<0.05]、[(13.06±9.34)%(6.56±5.53)%; P<0.05]、([22.50±16.70)%v(s12.53±10.43)%;P<0.05]。HU+IFN治疗组CD3~+、CD3~+CD8-、CD3~+CD8~+T淋巴细胞内INF-γ的表达与初发CML组没有显著性差异,[(10.05±8.23)%vs(11.08±12.05)%;P>0.05]、[(6.56±5.53)%vs(8.66±6.34)%;P>0.05]、[(12.53±10.43)%vs(15.29±10.01)%;P>0.05]。6.伊马替尼治疗后p-mTOR/p-S6增高组中,RAPA不影响该组CD3~+、CD3~+CD8-、CD3~+CD8~+T淋巴细胞内INF-γ表达,[(24.69±10.86)%vs(24.32±12.08)%;P>0.05]、[(18.79±8.72)%vs(17.0±6.53)%;P>0.05]、[(31.59±12.86)%vs(30.45±14.99)%;P>0.05]。7.伊马替尼耐药组中有2例(20%)患者CD33~+细胞内p-mTOR及p-S6含量增高,RAPA能降低其含量;RAPA不影响该2例患者CD3~+、CD3~+CD8-、CD3~+CD8~+T淋巴细胞内INF-γ的表达。8. 1例难治性CML急粒变经伊马替尼和RAPA联合治疗成功。结论:1.初发CML患者CD33~+细胞内存在mTOR/S6信号转导途径活化,RAPA能够抑制该活化。2.少部分伊马替尼治疗后CML患者CD33~+细胞内mTOR/S6信号转导途径会出现代偿性活化,RAPA能抑制该活化。3.少数伊马替尼耐药患者可能与mTOR/S6信号转导途径代偿性活化有关,RAPA能抑制该活化。4.伊马替尼治疗CML可能不影响细胞免疫功能;加用RAPA后亦可能不影响患者细胞免疫功能。5. RAPA联合伊马替尼可能是CML患者特别是伊马替尼耐药CML患者的一个新选择。