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本研究将酮康唑（Ketoconazole，KCZ）、丙酸氯被他索（Clobetasol Propionate，CP）及丁香酚（Eugenol）作为药物的有效成分，以纳米乳为载体，运用伪三元相图法，对处方进行筛选，制备了以纳米乳为载体的复方酮康唑纳米乳。考察其稳定性，安全性和体内外药效，为兽医临床运用提供了可靠依据。1.复方酮康唑纳米乳的制备及其质量评价为了研究纳米乳形成的因素，用伪三元相图法筛选复方酮康唑纳米乳的配方；用染色法，确定结构类型；用透射电子显微镜和激光粒度分析仪检测其形状和粒径分布；通过加速试验，光稳定性试验和温度稳定性试验，确定其稳定性。复方酮康唑纳米乳最佳配方为（重量百分比）：EL-4024.29%、乙醇4.91%、2-苯乙醇4.17%、乙酸乙酯7.33%、酮康唑1%、丙酸氯倍他索0.05%、丁香酚1%、水57.25%；复方酮康唑纳米乳的结构类型为水包油（O/W）型；棕黄色，澄清透明；乳滴呈球形，均匀分布，平均粒径为11.8nm，多分散系数为0.085；质量稳定。2.复方酮康唑纳米乳分析方法的建立利用高效液相色谱法，建立复方酮康唑纳米乳中酮康唑、丙酸氯被他索、丁香酚含量检测的分析方法。结果显示酮康唑、丙酸氯倍他索、丁香酚的标准曲线分别在60～220μg·mL-1，2～10μg·mL-1，5～165μg·mL-1浓度范围内线性关系良好；平均回收率分别为（99.69±1.14）%，RSD=1.14%；（98.60±1.69）%%，RSD=1.71%；（99.82±0.34）%，RSD=0.34%；日内、日间精密度的RSD分别为0.57%和1.41%；0.66%和1.38%；0.56%和1.36%。表明建立的复方酮康唑纳米乳的分析方法中回收率、精密度均符合要求，可以作为其含量测定方法。3.复方酮康唑纳米乳的安全性评价本试验经皮肤急性毒性试验、皮肤刺激性试验、皮肤过敏性试验考察复方酮康唑纳米乳的安全性。结果表明，高剂量复方酮康唑纳米乳对大鼠无急性毒性反应，临床使用剂量对受试动物完整皮肤、破损皮肤、均无明显的刺激性，受试动物无过敏现象发生。表明复方酮康唑纳米乳经皮给药刺激性小，可以安全使用。4.复方酮康唑纳米乳体外透皮效果研究用大鼠皮肤及透皮扩散仪进行透皮试验，考察复方酮康唑纳米乳的体外透皮效果。分别对复方酮康唑纳米乳，加2.5%氮酮、5%氮酮的复方酮康唑纳米乳，复方酮康唑软膏，1%酮康唑混悬液，0.05%丙酸氯倍他索混悬液、1%丁香酚混悬液的体外透皮效果进行对比。结果显示复方酮康唑纳米乳与加2.5%氮酮的复方酮康唑纳米乳的透皮速率无显著差异，二者的透皮速率均高于加5%氮酮的复方酮康唑纳米乳；复方酮康唑纳米乳透皮效果显著优于各主要成分的混悬液，复方酮康唑纳米乳中酮康唑和丙酸氯倍他索的透皮效果优于复方酮康唑软膏中两成分的透皮效果。表明复方酮康唑纳米乳经皮给药吸收效果好。5.复方酮康唑纳米乳的药效研究考察复方酮康唑纳米乳对酿酒酵母菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MFC）和杀菌时间，对复方酮康唑纳米乳的体外抑菌效果进行评价。结果表明，复方酮康唑纳米乳、酮康唑混悬液、克霉唑混悬液对白色念珠菌和酿酒酵母菌的MIC分别是0.5，0.5μg·mL-1；4，4μg·mL-1；8，32μg·mL-1；空白纳米乳和无菌生理盐水均无抑菌作用；白色念珠菌、酿酒酵母菌在8μg·mL-1酮康唑混悬液的作用下3h后，均未见生长；在1μg·mL-1复方酮康唑纳米乳的作用下1.5h后，均未见生长；在64μg·mL-1克霉唑混悬液的作用下4h后，2种菌均未见生长。表明复方酮康唑纳米乳对这两种真菌的体外抑菌性强。分离家兔痒螨并对其用药，记录死亡时间，考察其离体杀螨效果。结果显示复方酮康唑纳米乳的杀螨时间在67min，且无螨虫复苏的现象，癣螨净和除螨灵喷剂时间分别为1517min、2021min，且均有复苏的现象，空白纳米乳和蒸馏水无杀螨效果。表明复方酮康唑纳米乳离体杀满效果好。对患皮肤真菌病的犬分别用复方酮康唑纳米乳，复方酮康唑软膏，克霉唑软膏进行分组治疗，考察复方酮康唑纳米乳的在体抑菌效果。结果显示治愈率分别为96.7%、76.7%和73.3%，有效率分别为100%、83.3%和80.0%。将患有螨病的犬分别用复方酮康唑纳米乳、癣螨净、除螨灵喷剂进行分组治疗，考察复方酮康唑纳米乳的在体杀螨效果。结果显示治愈率分别为96.7%、70.0%和76.7%，有效率分别为100%、80.0%和80.0%。表明复方酮康唑纳米乳在除螨和抗菌方面均有较好的临床效果。制备的复方酮康唑纳米乳具有较高的安全性、稳定性及药效，可以为兽医临床用药提供新剂型。