小剂量肝素对脓毒症大鼠早期干预作用的基础研究

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目的:探讨小剂量肝素皮下注射对CLP致脓毒症大鼠的早期干预作用。方法:健康雌性SPF级Wistar大鼠96只,随机分为假手术组(8只)、脓毒症组(44只)、肝素干预组(44只),以盲肠结扎穿孔法(CLP)复制大鼠脓毒症模型。假手术组仅行盲肠翻动,皮下注射生理盐水(30ml/kg);脓毒症组予以CLP复制脓毒症动物模型,皮下注射生理盐水(30ml/(kg.12h));肝素干预组大鼠行CLP造模,给予皮下注射普通肝素(14U/(kg.12h),每次注射液体总量为30ml/kg),记录大鼠术后的一般状况,分别于不同时间点抽血、留取肺组织后处死大鼠,检测以下指标:①血浆PT、APTT及全血PLT的变化;②ELISA法检测血清巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor, MIF)水平变化;③光镜下观察肺脏组织病理学的改变;④48小时死亡率的变化。结果:1)CLP造模后6h大鼠出现厌食、蜷缩、竖毛,12h后逐渐出现呼吸急促、窘迫,腹腔解剖见肠管胀气,部分有脓性渗出,切取肺组织时见淡红色液体自切面渗出。2)CLP造模后6h即出现血小板的降低,术后24h出现PT、APTT的明显升高,肝素早期干预下(肝素干预组)血小板降低的程度及APTT升高的程度均较脓毒症组有显著改善(P分别为0.006,0.024);肝素干预组PT水平较脓毒症组比较无明显差异(P=0.111),但PT出现显著异常的时间较脓毒症组延迟。3)CLP造模后6h血清MIF水平即出现明显的升高(与假手术组比较,P<0.01),脓毒症组MIF水平在48h内随着时间的延长逐渐升高,肝素干预组MIF水平较脓毒症组相应时间点明显降低(P<0.01),并且肝素的持续作用可使大鼠血清MIF维持在一个相对较低的水平。。4)脓毒症组在CLP后6h即出现毛细血管扩张充血,肺泡间隔增宽,肺间质内炎细胞浸润,24h后部分可见灶性出血及微血栓形成,少部分肺泡腔内可见炎细胞渗出。随着脓毒症的进展上述病变逐渐加重,肺损伤病理评分逐渐增高;肝素干预组较脓毒症组肺损伤程度减轻,与脓毒症组比较肺损伤病理评分有显著差异(F=20.674,P<0.01)。5)脓毒症组大鼠48小时死亡率为65%,肝素干预组大鼠48小时死亡率为30%,存在显著差异(P<0.05)。结论:在CLP致脓毒症大鼠动物模型中,早期应用小剂量肝素皮下注射可改善脓毒症凝血功能紊乱,明显降低血清中MIF的水平,减轻肺脏组织损伤程度,降低48小时死亡率。
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