金银花新品种“渝蕾一号”的组织培养及主要次生代谢产物含量的研究

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金银花新品种“渝蕾一号”(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz. YuleiNo.1)为忍冬科忍冬属植物。2009年经重庆市有关专家审定为新品种,其良种编号为“渝S-SV-LM-005-2008",也是重庆首个药用新品种。随着对新品种研究的不断深入,以“渝蕾一号”新品种为原料的新产品不断被开发,市场需求量越来越大。在产业快速发展的同时,种苗的需求也达到了最大。最近两年,种苗的供应非常紧张。目前,“渝蕾一号”种苗的繁育主要是通过嫁接和扦插,但由于嫁接和扦插成活率低,繁殖系数小,容易使植株带病菌,造成品质降低无法满足市场的需求。因此,需要建立一个增殖系数高,繁殖快的离体快速繁殖体系,以便可以培育出更多的优质种苗来满足市场的需要。本文探索了金银花新品种“渝蕾一号”的离体快速繁殖过程。通过试验得出外植体灭菌时间、叶片愈伤组织的诱导和增殖、丛生芽的诱导和增殖及生根培养等过程的培养基激素组合,同时对试管苗移栽、组织培养前后植株中绿原酸含量的变化等进行了系统的研究。其研究主要结果如下:1、外植体选择和灭菌时间的确立:以金银花新品种“渝蕾一号”的叶片和茎段为外植体。茎段经过75%的酒精处理25s后再用0.1%的升汞溶液消毒2-3min达到最佳效果;叶片经75%的酒精处理25s后再用0.1%升汞溶液消毒1~2min达到最佳效果。2、茎段丛生芽和叶片愈伤组织的诱导:茎段最佳的诱导培养基为;MS+6-BA1.0mg/L,萌动率可达70%;叶片诱导培养基为:MS+6-BA2.0mg/L,愈伤组织诱导率可达90%。3、丛生芽和愈伤组织的增殖:采用不同激素的组合,得出适合丛生芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg+NAA0.2mg/L,增殖系数为3.70;适合愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+6-BA1.0+NAA1.5mg/L,愈伤组织的增长率可达18.4%。4、生根培养及移栽:最佳生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+NAA0.2mg/L,生根率为93.3%,将根系生长良好的组培苗,经过炼苗后移栽到消过毒的珍珠岩和腐殖质(1:1)基质中,覆盖塑料薄膜注意保持水分,成活率可达90%。5、绿原酸含量的研究:对组织培养前后植株叶片中绿原酸含量进行对比测底。结果表明:组织培养前后绿原酸变化不显著。
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