论文部分内容阅读
近年来,猪场发生细菌病问题越来越突出,在排污水中检测到大量的细菌存在,由于用药不合理和管理不规范,部分养猪场使用广谱药物进行细菌病防治,使得细菌耐药菌株增多,耐药性越来越复杂,不但对猪场环境造成污染,也会对细菌病的临床用药防治带来困难,同时制约养猪业的健康发展和影响公共卫生安全。本研究首先对贵阳市花溪区5个规模化养猪场主要疫病进行调查分析,其次对猪场排污水进行细菌分离鉴定、致病性和主要分离菌的耐药性分析,最后对猪场环境消毒前后猪场细菌含量变化分析,以期为猪场细菌性疾病的预防和控制提供一定参考依据。1.花溪区猪场主要疫病调查通过对2017年~2020年4年间贵阳市花溪区随机选取的5个规模化养猪场采取实地走访和查阅档案资料等方式,对生猪养殖情况、猪场常见疫病种类和细菌性疾病药物防控情况进行调查,结果显示:在生猪养殖情况上,花溪区自2017年~2020年生猪生产总体呈现下滑趋势,生产量由2017年10.84万头下降到2020年3.39万头,下降率68.73%;猪场常见疫病种类存在细菌病、蠕虫病和病毒病,其中细菌病平均发病率9.21%(1 660/18 029),蠕虫病平均发病率5.38%(970/18 029),病毒病平均发病率3.50%(632/18 029),细菌病和蠕虫病混合发病率最高为4.2%(757/18 029)。结果表明猪场最常见疫病为细菌病,其次是蠕虫病和病毒病;从药物防控调查情况显示,以使用药物预防和治疗为主要措施,养殖场最常用的防治药物为β-内酰胺类、磺胺类和氟苯尼考类等抗菌类药物。2.花溪区猪场排污水主要细菌分离鉴定采集花溪区5个规模化养猪场排污水样本,采用细菌计数法、分离培养、生化鉴定、PCR鉴定和致病性试验,结果显示:花溪区5个规模化养猪场排污水中细菌含量2.4×105CFU/L~5.8×105CFU/L,均超过国家标准(GB4789.2-2010);排污水中细菌经分离培养进行菌落形态观察、革兰氏染色镜检、生化鉴定和PCR鉴定,共分离鉴定到4种主要优势菌,分别命名为HX-1~4,其中(1)HX-1株呈圆形、光滑、边缘整齐、湿润和微隆起的α溶血,中等大小的菌落,革兰氏染色镜检可见呈葡萄串状排列、革兰氏阳性的球菌;(2)HX-2株呈圆形、光滑、湿润和边缘整齐,中等大小的菌落,革兰氏染色镜检呈双排列的革兰氏阴性杆菌;(3)HX-3株呈表面圆形、光滑、湿润、边缘整齐、微隆起、灰白色中等大小的菌落,经革兰氏染色镜检为革兰氏阴性呈单双排列短小杆菌;(4)HX-4株呈表面圆形、光滑、湿润、边缘整齐、微隆起和灰白色中等大小的菌落,经革兰氏染色后为革兰氏阳性呈单双排列的大杆菌。在致病性试验中,溶血性葡萄球菌的致病性最强、大肠埃希氏菌次之、不动杆菌最弱和赖氨酸杆菌不致病。3.花溪区猪场排污水主要病原菌药敏试验采用纸片扩散法,随机选取分离鉴定的4种主要优势菌,其中溶血性葡萄球菌25株、不动杆菌16株、大肠埃希氏菌20株和赖氨酸杆菌共10株进行药敏试验,结果显示:(1)溶血性葡萄球菌对头孢拉定、庆大霉素和红霉素等药物敏感率分别76%(19/25)、72%(18/25)和68%(17/25),对丁胺卡那和头孢哌酮药物中度敏感率分别20%(5/25)和16%(4/25),对苯唑西林、氨卡西林和四环素药物表现出较强的抗性,其耐药率分别为68%(17/25)、64%(16/25)和60%(15/25),对庆大霉素和头孢拉定的耐药率最低为20%(5/25);(2)不动杆菌对丁胺卡那、四环素和红霉素等物敏感率为75%(12/16)、68.75%(11/16)和68.75%(11/16),对头孢拉定、庆大霉素和头孢唑啉药物中度敏感率分别37.5%(6/16)、31.25(5/16)和31.25(5/16),对苯唑西林药物表现出较强的抗性,其耐药率分别为62.5%(10/16),对丁胺卡那的耐药率最低为18.75%(3/16);(3)大肠埃希氏菌对庆大霉素、氨苄西林和米诺环素等药物敏感率分别为75%(15/20)、75%(15/20)和70%(14/20),对丁胺卡那、红霉素和头孢噻啶等药物中度敏感率分别40%(8/16)、30(6/16)和30(6/16),对青霉素药物表现出较强的抗性,其耐药率分别为65%(13/20),对庆大霉素和哌拉西林的耐药率最低为15%(3/20);(4)赖氨酸杆菌对米诺环素、红霉素和丁胺卡那等药物敏感率分别为70%(7/10)、70%(7/10)和70%(7/10),对新霉素、头孢曲松和头孢哌酮药物中度敏感率分别50%(5/10)、50%(5/10)和50%(5/10),对头孢噻啶药物表现出较强的抗性,其耐药率分别为60%(6/10),对米诺环素的耐药率最低为10%(1/10)。根据药敏试验的结果,可为猪场细菌病合理用药提供参考建议。4.环境消毒对猪场细菌含量的影响通过使用消毒灵(二氯异氰酸钠)和劲碘(碘-磷酸复合液)消毒剂对3个规模化养猪场环境进行喷洒消毒前后比较,采用平板计数法进行细菌含量检测。结果显示:(1)消毒前后空气中A场含菌量平均值由9.66×104CFU/m3降低为6.17×103CFU/m3、B场含菌量平均值由9.48×104CFU/m3降低为5.73×103CFU/m3和C场含菌量平均值由9.68×104CFU/m3降低为6.97×103CFU/m3;(2)消毒前后粪便中A场含菌量平均值由166.06×104CFU/g降低为9.73×104CFU/g、B场含菌量平均值由165.58×104CFU/g降低为9.67×104CFU/g和C场含菌量平均值由165.83×104CFU/g降低为9.86×104CFU/g;(3)消毒前后污水中A场含菌量平均值由27.92×104CFU/L降低为3.9×104CFU/L、B场含菌量平均值由27.46×104CFU/L降低为3.82×104CFU/L和C场含菌量平均值由27.75×104CFU/L降低为4.09×104CFU/L。结果表明,消毒剂的使用能有效降低猪场细菌含量。综上所述,贵阳市花溪区5个规模化养猪场日常主要疫病为细菌病,其次是蠕虫病和病毒病;使用抗菌药物主要为β-内酰胺类、磺胺类和氟苯尼考类等;选取的4种主要优势菌中,溶血葡萄球菌致病性最强,大肠埃希氏菌次之,不动杆菌的最低,赖氨酸杆菌不致病;药敏试验显示,溶血性葡萄球菌对头孢拉定、庆大霉素和红霉素等药物敏感,不动杆菌对丁胺卡那、四环素和红霉素等物敏感,大肠埃希氏菌对庆大霉素、氨苄西林和米诺环素等药物敏感,赖氨酸杆菌对米诺环素、红霉素和丁胺卡那等药物敏感;消毒剂对猪场环境进行消毒,消毒前后空气、粪便和排污水中细菌含量明显降低。这些试验结果为猪场细菌性疾病预防和控制提供一定的科学依据。