犬流感病毒对猫的致病性研究

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近年来,流感疫情在世界各地频繁发生,至今尚未得到有效控制,其流行常具有周期性,并容易造成世界性大流行。我国华南地区是世界公认的流感多发地,有利于流感病毒的重组和传播。到目前为止,已有报导指出,H1N1、H3N2、H3N8、H5N1亚型流感病毒可跨种属感染犬;H1N1、H2N2、H3N2、H5N1、H7N7等亚型的流感病毒可以跨种属感染猫。犬和猫作为伴侣动物,与人类亲密接触,因此研究犬、猫流感病毒的病原学、生态学及流行病学,具有重要的公共卫生学意义。   为了研究H3N2亚型的犬流感病毒是否会跨种间传播感染家猫,本试验以2007年在我国华南地区分离到的犬流感毒株A/canine/Guangdong/01/2007(H3N2)为研究对象,通过气管注射和滴鼻两种途径感染3-4月龄健康家猫,两组均设置同居组和空白对照组。定期观察试验猫的发病情况,采集鼻咽拭子和肛门拭子检测排毒情况。试验结果表明:气管注射组和滴鼻组在感染后出现了体温升高,有眼鼻分泌物,喷嚏,食欲减退等临床症状;气管注射组和滴鼻组的试验猫于感染后第2-7d均在鼻咽拭子中检测到病毒,肛门拭子均没有检测到病毒;除了肺组织外,心脏、肝脏、脾脏、肾脏、胰腺、肠系膜淋巴结、大脑、小脑、空肠和结肠等脏器组织中均未分离到病毒。   将从猫上分离到的病毒命名为A/feline/Guangdong/01/2010(H3N2),简称FGD1。 FGD1的全基因组序列测定结果表明:FGD1的8个基因片段均与A/canine/Guangdong/01/2007(H3N2)的亲缘性最近,其核苷酸的相似性为99.1%-99.9%;HA蛋白裂解位点处的序列为PEKQTR↓ GLF,蛋白切割位点附近仅有2个碱性氨基酸的插入,且不是连续出现,符合低致病性流感病毒的HA蛋白裂解位点处的氨基酸序列的分子特征;NA基因与神经氨酸酶抑制剂耐药性产生相关的位点高度保守,表明FGD1对达菲类药物敏感;在M2蛋白跨膜区的氨基酸位点未发生变异,表明FGD1对金刚烷胺和金刚乙胺敏感;PB2基因的627位点为E,符合禽流感病毒的特征。   本试验成功地用H3N2亚型犬流感病毒来感染家猫,并表现一定的临床症状。初步建立了犬流感病毒感染猫的动物模型,为犬流感的进一步研究提供了依据。同时,成功分离到病毒FGD1,对其遗传演化分析表明,犬源流感病毒在异种动物猫上并没有发生明显的变异。这对犬流感的跨种间传播有重要的意义,也有利于制定各种流感的防制措施。
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