新疆紫草离体培养及光质对其再生与萘醌类色素积累的影响

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新疆紫草[Arnebia euchroma(Royle)Johnst]为紫草科(Boraginaceae)软紫草属(Arnebia Forssk)多年生草本植物,以干燥根为药用,具有清热凉血,活血解毒,透疹消斑等功效。除有重要药用价值外,新疆紫草还具有经济价值,导致其野生资源被过度采集。同时,新疆紫草因栽培困难,对生境要求严格,生长周期长等原因,野生资源急剧减少,成为濒危物种,保护已迫在眉睫。本文对新疆紫草离体培养进行研究,包括种子的消毒灭菌与出苗处理、再生体系的建立、光质对植株再生(形成、生长及生根)及次生代谢产物(紫草素、β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁)含量的影响。以期缓解新疆紫草资源短缺压力及扩大资源的利用与保护途径。本文主要研究结果如下:1.对新采收的新疆紫草种子进行消毒与出苗处理。经过75%乙醇浸摇10 s后,比较新疆紫草种子经两种消毒剂(H2O2,HgCl2)在不同时间处理后的污染率与坏死率,结果显示:75%乙醇处理10 s后,以15%H2O2为消毒剂,22 min处理下新疆紫草种子消毒灭菌效果最佳;对新疆紫草种子进行不同处理(包括低温、变温、活性炭、赤霉素),认为利于新疆紫草种子出苗条件:1/2MS+变温+AC+GA3,经该条件处理后的新疆紫草种子萌发率达54.11%,显著高于其他处理。2.以无菌苗芽尖及下胚轴作为外植体,建立新疆紫草再生体系。通过优化诱导出芽培养基与诱导生根培养基的激素配比,获得芽诱导培养基:0.1 mg/L NAA+2.0 mg/L KT+0.5 mg/L 6-BA;最佳诱导生根培养基:0.5 mg/L NAA+1.0 g/L AC,生根率为70.10%。以营养土与蛭石比例1:1为基质,进行炼苗移栽,4周后新疆紫草组培苗存活率最高,为58.3%。3.以无菌苗子叶为外植体,研究不同光质对新疆紫草的再生(即形成、增殖、生长、发育和生根)。结果显示:在植株形成和芽增殖阶段,红:蓝:白(1:1:2)组合光培养下有最大值的鲜重、干重、发芽率、芽数与增殖率;在生长发育及生根阶段,LED红色下最大值生长指数、芽高、叶片数、光合色素含量及生根率。4.以无菌苗叶片为外植体诱导不定根,研究不同光质对新疆紫草不定根及组培苗地上部分中萘醌类色素积累的影响。结果发现:黑暗处理下不定根中紫草素与β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁含量最高;LED红光处理下组培苗地上部分的紫草素与β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁含量最高;而白光处理(白色荧光、LED白光)不利于对新疆紫草不定根组培苗地上部分中紫草素与β,β-二甲基丙烯酰阿卡宁积累。
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