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背景白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病，由于白细胞在分化、成熟的过程中受到某些因素的影响使其分化发育停止，以至于白细胞停留在不同的发育阶段并无限制地的克隆。在骨髓和其他造血器官中，白血病细胞大量堆积并抑制正常造血细胞的功能。白血病人的免疫系统的功能受到严重的抑制，以至于病人发生发热、出血、贫血，后期累及体内多种器官衰竭死亡。所以白血病人的免疫系统功能的恢复对白血病人的生存率和生活质量都有很大的帮助。TNFAIP8L2(tumor necrosis factor-a-induced protein-8like2)即TIPE2是最近发现的一个重要的免疫负调控因子，参与多种肿瘤疾病的发生和发展。TIPE2在淋巴细胞白血病人的外周血中的表达量是升高的，TIPE2基因沉默后影响Jurkat细胞的生长，并影响JNK1和新型基因PCNP的表达，由此，本课题主要研究的是TIPE2对白血病Jurkat细胞的生物学功能的影响，以及TIPE2、PCNP、JNK1三者之间的关系，为更进一步探讨TIPE2是否调控白血病的发生奠定基础。目的在白血病Jurkat细胞中将TIPE2基因过表达后，检测其生物学功能的改变同时将PCNP和JNK1分别沉默和过表达后检测对TIPE2的表达量的影响，和对Jurakt细胞生物学功能的影响。方法将TIPE2的CDS区重组到过表达质粒pcDNA3.1(-)中，并将重组质粒pcDNA3.1(-)-TIPE2电转到白血病Jurkat细胞中，加药进行筛选并筛出稳定株。在mRAN水平上用qPCR方法检测TNFAIP8家族其他成员（TNFAIP8，TIPE1，TIPE3）的表达量。用台盼蓝染色人工计数的方法作出生长曲线图，用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。用NBT检测细胞的分化情况，用Transwell小室检验对细胞迁移的影响。用免疫印迹杂交（Western Blot）方法检测TIPE2过表达后对基因PCNP（PEST-containing nuclearprotein））、JNK1（c-Jun N-terminal kinase1，JNK1）、Caspase3、Caspase8的表达量的影响，从而分析TIPE2在白血病中可能发挥的作用。在Jurkat细胞中利用基因沉默技术将PCNP沉默和利用基因抑制剂将JNK1基因沉默后观察对TIPE2的影响，另一方面将PCNP和JNK1过表达后观察对TIPE2的影响，同时检测PCNP和JNK1对Jurkat细胞生物学功能的影响，进而弄清楚TIPE2、PCNP、JNK1三者之间的关系以及是怎样影响Jurkat细胞生物学功能的。结果成功构建TIPE2基因过表达重组质粒并稳定转染到Jurkat细胞中，在mRNA水平，qPCR结果显示TIPE2基因过表达比对照组高30多倍（P<0.05），在蛋白水平，WesternBlotting结果显示TIPE2基因过表达后的表达量也是增高的。qPCR结果显示，TIPE2基因过表达后使TIPE3的表达量上调（P<0.05），而对TNFAIP8和TIPE1没有太大的影响（P>0.05）。台盼蓝染色人工计数结果显示TIPE2基因过表达后Jurkat细胞生长增快（P<0.05）。用流式细胞术检测细胞周期发现无明显变化（P>0.05），细胞凋亡也没明显变化（P>0.05），Western Blot结果显示并没有激活Caspase3和Caspase8，所以这两方面说明TIPE2不影响细胞的凋亡。利用NBT方法检测细胞的分化情况，结果没有明显的差异（P>0.05）。利用Transwell小室检测细胞迁移的情况，发现TIPE2过表达后细胞的迁移能力增强了（P<0.05）。Western Blott结果显示，TIPE2过表达后PCNP的表达量降低（P<0.05）而JNK1的表达量增加（P<0.05）。将PCNP和JNK1分别沉默和过表达后发现，PCNP通过影响细胞周期来影响细胞的生长（P<0.05），但对细胞凋亡没有影响（P>0.05），对细胞分化没有明显的影响（P>0.05），对细胞的迁移没有明显影响（P＞0.05）。而JNK1对细胞的生长、凋亡、分化和迁移都没有明显的影响（P>0.05）。Western Blot结果显示PCNP对TIPE2有影响而对JNK1没有影响，而JNK1对TIPE2没有影响对PCNP有影响。这就说明三者之间相互作用从而影响细胞的生物学功能。结论1、TIPE2可以通过影响PCNP和JNK1来影响Jurkat细胞的生长，但对细胞凋亡没有影响。TIPE2可以影响Jurkat细胞的迁移，并与之呈正比；2、PCNP可以通过影响细胞周期来影响Jurkat细胞的生长，两者呈正比，对凋亡没有影响；3、TIPE2、PCNP和JNK1之间有相互关系:①T IPE2和PCNP之间相互影响；(两者呈负相关)；②TIPE2可以影响JNK1的表达（两者呈正相关），而JNK1对TIPE2无影响；③PCNP对JNK1的表达没有影响，而JNK1可以影响PCNP的表达（两者呈负相关）。