松花粉对几种脂肪代谢酶抑制作用的研究

被引量 : 0次 | 上传用户:gisbird
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
马尾松花粉中富含人体所需的多种营养成分和酶、黄酮、核酸等生命活性物质,具有利尿,轻身,润心肺,除风湿等方面的作用。本文以马尾松花粉为原料,对马尾松花粉中的脂肪酶的最适反应条件进行测定;对松花粉进行水提及醇提分离纯化,得到的提取物分别作用于脂肪酶、脂肪酸合成酶及肉碱棕榈酰转移酶,得到如下的结论:1.马尾松花粉中脂肪酶最适反应条件的测定为研究松花粉中脂肪酶的最适反应条件,考察了温度(℃)、pH、底物、金属离子等因素对其酶活的影响。通过脂肪酶的催化水解作用,用95%乙醇终止反应,测定其酸价,进而求得酶活,选择出脂肪酶的最适反应条件。结果表明,最佳反应条件为:温度35℃,pH7.4,底物为三丁酸甘油酯,Ca2+、Fe3+、Mg2+、Fe2+会提高脂肪酶活力。2.松花粉提取物对脂肪酶活的影响以0.1mg/mL的奥利司他为阳性对照物,用三蒸水配制浓度为0、10、30、70、150、250(已比较难溶)mg/mL的松花粉水提物作用于脂肪酶,除在70mg/mL时表现出对脂肪酶活轻微的抑制作用外,花粉水提物对胰脂酶酶活基本无影响;以0.1mg/mL的奥利司他为阳性对照物,分别配制0、1、5、10、20、40mg/mL浓度的松花粉醇提物(DMSO溶解)溶液,进行酶活测定实验,与对照相比,松花粉醇提物对脂肪酶表现出抑制作用:在10mg/mL时抑制作用已相当明显,其半抑制常数为4.4mg/mL。测定不同加样顺序对酶活的影响,结果表明酶是先与抑制剂结合,从而阻止了酶与底物的结合,从而起到抑制作用的。通过对Lineweaver-Burk双倒数图和Dixon图的特征分析,表明松花粉醇提物对脂肪酶的抑制属于非竞争性抑制。求得松花粉醇提物的抑制剂常数为Ki=0.02,表明该抑制剂与酶的结合物很稳定。松花粉醇提物经离心,得沉淀与上清两种组分,经酶活测定得知上清对脂肪酶具有抑制作用;上清中加入石油醚,得到两种组分,橙黄色透明液体A1与黄褐色固体A2,对上清进行悬蒸浓缩得到油状液体。经酶活测定得知两种物质均对脂肪酶有抑制作用,但是A2颜色较深,对滴定结果有影响,故下面对A1进行分离纯化;波长241.00nm,流动相:34%乙醚:66%正己烷,对A1进行中压柱层析分离,共出现了六个峰,其中峰二、峰三与峰五比较明显。但峰一、峰二、峰三与峰四相离太近,分离的效果不是很好,故收集时将峰一、峰二与峰三收集在一起,称作组分B1,将峰五与峰六收集在一起,称为组分B2,通过甲醇冲柱,得到组分B3。组分B1、B2、B3进行脂肪酶活性分析,得出组分B1、B2、B3均对脂肪酶活具有抑制作用;乙醚:正己烷=1:9时,将组分B1进行中压柱层析,将峰一、峰二与峰三收集在一起,称为组分C1,峰四收集到的组分称为组分C2。对C1与C2进行酶活测定,组分C1与C2都对脂肪酶活具有抑制作用,但C1的抑制效果要好于C2;通过组分C1与C2的高效液相色谱(HPLC)分析,得出C1与C2都是一很杂的混合物。3松花粉提取物对脂肪酸合成酶活的影响从大鼠肝脏中提取脂肪酸合成酶,测得酶比活为2.1U/mg。选取质量浓度为100μg/mL的松花粉水提物与醇提物作用于脂肪酸合成酶,通过与水空白及阳性对照C75相比,松花粉水提物表现出对FAS显著的抑制作用,而醇提物则对FAS具有促进作用。4松花粉提取物对肉碱棕榈酰转移酶(CPT-1)活的影响大鼠心脏取血,离心后得血清,测得CPT-1的酶活为72.06IU/mL。选取质量浓度为100mg/mL的松花粉水提物与醇提物作用于CPT-1,通过与空白及阳性对照相比,对CPT-1都表现出抑制作用。
其他文献
本文以元末明初的寓言作品为研究对象,探讨了这一时期寓言的题材来源、风格特色、思想内容等。主要内容为:第一章主要写元末明初寓言的题材来源,从神话传说、历史故事、生活故
<正>7月10日,以"新·趣"为主题的"海宁家纺杯"2018中国国际家用纺织品创意设计大赛在海宁许村开始了为期三天的评审工作。由中国家用纺织品行业协会、中国国际贸易促进委员会
薪酬管理体系关系到员工的切身利益和企业整体目标的实现,是企业人力资源管理非常重要的一个部分。企业能否制定与设计出一套最能有效激励员工的薪酬管理体系成为大多数企业
绿色食品标准体系是绿色食品事业发展的技术基石,有什么样的标准就有什么样的产品。作为一项公共事业,绿色食品依据标准认证,通过21年的发展取得了重大成就,尤其在引领和推动
测量是保证产品精度与质量的重要环节。随着产品质量管理的规范化和法制化,如何应对企业中零件大批量、高精度和多参数的全数检测任务就成了一个亟待解决的难题。而视觉测量
目的探讨分析为下肢骨折髓内钉内固定术后骨不连患者行附加侧方钢板手术治疗的临床疗效。方法将我院66例下肢骨折髓内钉内固定术后骨不连患者随机等分为两组,每组各33例。为
宠物疾病临床诊疗技术课程是渭南职业技术学院宠物养护与疫病防治专业的一门主干课程.为了提高该课程的教学质量和技能的培养,我们对教材内容体系、课程的设计、教学的组织、
云计算是一个新兴的商业计算模型,它将计算任务分布在大量计算机构成的资源池上,使各种应用系统能够根据需要获取计算力、存储空间和各种软件服务。作为云计算服务重要的模式
进入21世纪以来,世界经济体系中出现了一个重要概念,就是“金砖四国”,其英文缩写是BRIC。即由巴西、俄罗斯、印度、中国英文名称的首字母拼写而成。由于BRIC的英文涵义是“砖”
[背景与目的]:miR-15a是一个具有抑癌基因功能的、在肿瘤发生发展中起着重要作用的microRNA,能通过抑制BCL-2、Cyclin D1等靶基因的表达从而调控细胞周期,抑制细胞增殖,促进细