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目的不同剂量TTF1-NP分别诱导HepG-2, Hep3B及Chang Liver细胞凋亡,探讨TTF1-NP对不同肝癌细胞及正常肝细胞的作用及其涉及的内质网应激作用机制。方法通过MTT法观察不同时间(24h,48h,72h)、不同浓度(25,50,100μnmol/L)的TTF1-NP对人肝癌细胞及正常肝细胞的增殖抑制作用,并选取TTF1-NP的最适干预浓度和时间；通过HE, Hoechst和AO/EB染色观察TTF1-NP诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的形态学变化；利用流式细胞仪检测人肝癌HepG-2细胞的凋亡情况；通过Western Blot和免疫细胞化学染色技术检测TTF1-NP诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的内质网应激相关蛋白GRP78, CHOP, JNK, p-JNK及Caspase-4的表达情况。结果1.MTT法检测细胞增殖抑制结果显示：不同浓度的TTF1-NP干预3种细胞不同时间后,3种细胞生长均受到不同程度的抑制,且呈一定的浓度和时间依赖关系。其中TTF1;NP对人肝癌HepG-2细胞抑制最为明显,Hep3B其次,TTF1-NP对Chang Liver细胞抑制不显著。2.形态学检测结果显示：(1)光学显微镜检测结果(HE染色)：对照组HepG-2细胞呈梭形,细胞延展性较好,细胞核规则。随着药物剂量增加,细胞数减少,形态改变,细胞变圆,变小,细胞核固缩,碎裂,细胞核深染。(2)荧光显微镜检测结果：AO/EB染色结果显示,对照组细胞几乎全部呈绿色,有少量黄绿色细胞。加药组细胞随药物浓度增加,细胞多染为红色；Hoechst染色结果显示,对照组细胞染色均匀,呈微弱均匀蓝色,加药组细胞随用药量增加,细胞减少,细胞核内可见颗粒块状蓝色荧光。3.流式细胞仪检测结果：对照组细胞存活率为91.34%,凋亡率仅为4.92%。加药组细胞随药物浓度增加存活率逐渐下降,凋亡率逐渐上升。100μmol/L浓度处理组细胞,凋亡率达93.79%,存活率仅为4.17%。4.ERS关键蛋白检测结果：Western Blot检测结果显示,对照组细胞内ERS起始蛋白GRP78及ERS凋亡蛋白p-JNK及Caspase-4表达量很低,随着药物浓度增加,表达逐渐升高。CHOP蛋白对照组不表达,加大药物刺激浓度CHOP蛋白表达。免疫细胞化学染色检测结果与Western Blot检测结果基本相同。5.内质网应激抑制剂4-PBA干预结果显示,对照及对照-4-PBA干预组内质网应激相关蛋白GRP78, p-JNK及Caspase-4表达量无明显变化,而TTF1-NP组与TTF1-NP-4PBA组表达量变化显著,有统计学差异。结论TTF1-NP可以诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡；内质网应激途径是TTF1-NP诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的主要作用机制之一