目的：　　性发育异常 (Disorders of sex development, DSD) 是以性染色体、性腺和附属性器官解剖学异常发育所致的一组先天性疾病，会不同程度地影响患者的生殖功能。更重要的是可能诱发患者性发育、性心理、性行为等方面相关的问题，造成其心理与行为偏差，处理不当可能成为社会问题。因此，对这类患者早期诊断和治疗极为重要。DSD 遗传学确诊是治疗的基础，遗传诊断在辅助临床诊断的同时能够改善患者的心理状态，深入了解疾病的发病机制，并为临床医师选择治疗方案提供重要参考。本研究拟通过收集 DSD病例，针对发病率较高的三类疾病建立标准化遗传诊断方法。包括雄激素不敏感综合症(Androgen insensitivity syndrome, AIS) 致病基因 AR、5α-还原酶缺乏症 (Steroid 5α-reductase deficiency) 致病基因 SRD5A2、先天性肾上腺皮质增生症(Congenital adrenal cortical hyperplasia, CAH)主要致病基因CYP21A2。从而分析DSD 患者遗传病因，以期为 DSD 患者的诊断及患者家庭产前诊断提供更多适宜技术。　　方法：　　联合运用 Sanger 测序、荧光定量 PCR(Q-PCR)以及多重酶联依赖探针扩增技术(Multiplex ligation-dependent probe amplification, MLPA)等分子诊断技术优化建立AR基因、SRD5A2基因、CYP21A2基因诊断方法。并通过建立的方法对临床诊断为性发育异常的69例患者，包括4例先天性肾上腺皮质增生症患者，行 AR、SRD5A2、CYP21A2 基因分析。对检出的候选致病突变行家系分析。　　结果：　　1. 69例性发育异常患者中，共检出36例患者存在突变。(1) 8例患者在AR基因上存在突变，共检出6个不同的突变，包括2个未报道过的新突变：c.1792A>C和c.2606C>T。(2) 26例患者在SRD5A2基因上存在突变，共检出16个不同的突变，包括3个未报道过的新突变c.269A>C 、c.365A>G、 c.662T>G。21例患者为 SRD5A2基因复合杂合突变，5例患者为纯合突变。SRD5A2基因1号和4号外显子为突变热区。c.680G>A和c.16C>T为突变热点。(3) 2例患者在CYP21A2 基因上检出了突变。1 例患者为 CYP21A2 基因 E3 杂合缺失和c.518T>A杂合突变的复合杂合突变。另1例患者为c.293-13C>G纯合突变。　　2. 对收集的病例中两个有生育要求的家系行产前基因检测。结果显示1个胎儿未携带与先证者相同的 AR基因 c.2248A>G突变。另 1个胎儿携带与先证者相同的CYP21A2基因c.293-13C>G纯合突变。　　结论：　　1. 建立了以Sanger测序方法为基础的AR基因和SRD5A2基因诊断与产前诊断方法，以及联合巢氏 PCR 特异性扩增测序、Q-PCR 技术检测CYP21A2基因的基因诊断体系。　　2．运用本研究建立的AR、SRD5A2基因诊断方法，对65例46,XY DSD患者进行了 AR、SRD5A2基因分析，明确了 34例性发育异常患者的遗传病因。8例患者为AR基因突变，26例患者为SRD5A2基因突变。5例患者中共检出5个不同的新突变。其中，2个新突变位于 AR基因，3个新突变位于 SRD5A2基因。丰富了AR基因和SRD5A2基因突变谱。　　3．运用本研究建立的 CYP21A2 基因诊断方法，对 4 例 CAH 患者进行了CYP21A2基因分析， 2例患者为CYP21A2基因突变。　　4. 本研究成功对两个遗传诊断明确且有生育要求的家庭进行了产前基因诊断。