Stat5表达与HPV16载量之间的关系及在子宫颈病变中的变化

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目的:在全球女性中子宫颈癌是第二大癌症,高危型HPV持续感染是发生子宫颈癌的最大风险因素。与此同时,子宫颈癌亦是多因素疾病,是病毒与宿主相互作用的结果,其中信号转导通路蛋白5(Stat5)与癌症的发生发展密切相关,在此次研究中主要探究Stat5蛋白在子宫颈病变中的表达,分析在子宫颈病变组织中HPV16病毒载量的变化,并分析HPV16病毒载量与Stat5蛋白之间的关系。研究方法:本研究选择临床子宫颈病理组织为研究对象进行实验。共选取子宫颈病变样本140例,包括正常子宫颈样本25例,低度鳞状上皮内病变(Lowgrade squamous intraepithelial lesions,LSIL)35例,高度鳞状上皮内病变(Highly squamous intraepithelial lesions,HSIL)55例,子宫颈鳞癌组织25例。采用免疫组织化学方法在不同程度的子宫颈病变组织中检测Stat5a,Stat5b以及磷酸化Stat5(pStat5a、pStat5b)的表达水平,采用one way-ANOVA检验进行差异性分析。另外,将HPV16阳性的子宫颈病变组织抽提DNA,以其为模板进行定量PCR鉴定子宫颈病变组织中HPV16病毒载量,分析不同等级的子宫颈病变与HPV16病毒载量之间的关系,并将其与Stat5的表达进行相关性分析。结果:Stat5a在低度鳞状上皮内病变组织中的表达与正常组织相比差异不显著,但其表达水平随子宫颈病变的进展程度而升高,呈正相关(P<0.01)。在子宫颈正常组织、LSIL、HSIL、子宫颈鳞癌各组中Stat5a高表达所占比例分别为25.0%(5/20)、13.3%(4/30)、68.7%(33/48)、96.0%(24/25);Stat5b的表达在正常子宫颈组织与低度鳞状上皮内病变组织中差异不明显,但表达水平也随子宫颈病变的进展程度而升高,呈正相关(P<0.01)。在子宫颈正常组织、LSIL、HSIL、子宫颈鳞癌各组中Stat5b高表达所占比例分别为17.4%(4/23)、6.2%(2/32)、47.1%(24/51)、86.9%(20/23);pStat5a表达随子宫颈病变的进展程度而降低,呈负相关(P<0.01)。在子宫颈正常组织、LSIL、HSIL、子宫颈鳞癌各组中pStat5a高表达所占比例分别为96.0%(24/25)、84.8%(28/33)、44.9%(22/49)、16.0%(4/25);pStat5b表达随子宫颈病变的进展程度而降低,呈负相关(P<0.01)。在子宫颈正常组织、LSIL、HSIL、子宫颈鳞癌各组中pStat5b高表达所占比例分别为80.9%(17/21)、62.8%(22/35)、34.8%(16/46)、0.0%(0/23);在子宫颈病变组织中分析HPV16病毒载量发现随着子宫颈病变的进展,其HPV16含量逐渐增加,在定量PCR中,我们以GAPDH为内参,用maxΔCT-ΔCT来评估HPV16在细胞中的含量,其中maxΔCT取值20,在LSIL、HSIL、子宫颈癌各组中maxΔCT-ΔCT的平均值分别为11.94±0.68,14.44±0.48和18.56±1.24,统计学分析有差异,随着子宫颈病变进展逐渐增高。另外,在同一标本中进行HPV16病毒载量与Stat5蛋白的相关性分析,发现其在磷酸化水平上明显相关。结论:在本研究中发现,随着子宫颈病变组织的进展,Stat5a,Stat5b的表达逐渐增加,而其磷酸化水平下降。且在子宫颈组织中Stat5的表达与HPV病毒载量相关,说明在HPV16感染状态下,子宫颈病变的进展可能与Stat5蛋白有关,这可能为子宫颈病变的预防或治疗提供新的靶点。
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