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目的:肺癌转移相关蛋白1（lung cancer metastasis related protein1，LCMR1）的编码基因是我们实验室采用差异显示技术(DDRT-PCR)克隆到的新基因（GenBank ID：AY148462）。目前，其生物学功能尚不十分清楚。我们在前期研究中，通过蛋白-蛋白相互作用方法找到LCMR1相互作用蛋白DEK。本实验拟进一步揭示LCMR1与DEK的结合区域，并借助相互作用蛋白DEK功能区提供的线索，开展LCMR1功能研究，探讨其在细胞凋亡中的作用及作用机制，为在基因水平预防和治疗肺癌寻找新的分子靶点，为抗癌药物的研发和肺癌治疗提供线索和分子基础。方法:（1）构建DEK（N端）功能区质粒及DEK（C端）功能区质粒，使用TNT兔网织红细胞裂解液体系，在体外快速转录翻译DEK(N端)功能区蛋白及DEK（C端）功能区蛋白。（2）应用大肠杆菌原核表达系统，以pGEX-5T质粒及pGEX-5T-LCMR1质粒为模板，诱导表达GST蛋白及GST-LCMR1融合蛋白。（3）采用GST融合蛋白沉降(GST Pull-down)技术，研究LCMR1与DEK(N端)功能区、DEK（C端）功能区的结合情况，并借助DEK功能区提供的线索，初步推测LCMR1功能。（4）采用小干扰RNA技术敲减LCMR1，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）及蛋白印迹（Western Blot）方法，在mRNA水平及蛋白水平验证LCMR1下调效果。（5）采用流式细胞术及PI染色法，检测LCMR1下调后95D细胞系、A549细胞系及H1299细胞系中凋亡细胞数量的变化；采用Western Blot方法，检测LCMR1下调后细胞凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-8及caspase-9表达量变化；采用分光光度法检测LCMR1下调后细胞凋亡相关蛋白caspase-3，caspase-8及caspase-9活性变化；采用qRT-PCR及Western Blot方法，检测LCMR1下调后细胞Bax，Bid及Mcl-1mRNA水平和蛋白水平变化。结果:（1）成功构建DEK功能区质粒，并在体外成功转录翻译功能区蛋白。（2）成功原核诱导表达并纯化GST蛋白及GST-LCMR1蛋白。（3）通过GSTpull-down实验证实，LCMR1与DEK（N端）功能区有相互作用， LCMR1与DEK（C端）功能区无相互作用。（4）从mRNA水平和蛋白水平验证了设计的LCMR1小干扰RNA对LCMR1有明显的敲减效果。（5）LCMR1与细胞凋亡关系研究发现，LCMR1下调导致：①凋亡细胞增加并出现明显凋亡峰；②活化的Caspase-3蛋白表达增加、活性增强。（6）LCMR1的凋亡机制研究发现，LCMR1下调导致：①活化的Caspase-8蛋白及活化的Caspase-9蛋白表达增多、活性增强；②肺腺癌A549（p53+/+）细胞凋亡增加，肺腺癌H1299（p53-/-）细胞凋亡无明显增加；③促凋亡因子Bax及Bid表达升高，抑凋亡因子Mcl-1表达下降。结论:（1）LCMR1与DEK（N端）功能区有相互作用，根据相互作用蛋白DEK功能区的线索，推测LCMR1与细胞凋亡相关（。2）成功设计并选取LCMR1的小干扰RNA，并验证其对LCMR1有明显的敲减效果。（3）LCMR1下降可引起细胞凋亡增加，LCMR1与细胞凋亡负相关。（4）LCMR1同时参与内源性及外源性凋亡通路。（5）LCMR1依赖P53基因通路影响细胞凋亡。（6）LCMR1通过Bcl-2家族基因调控细胞凋亡。