【摘 要】
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鹅沙门氏菌病又称鹅副伤寒,是一种传播速度快、发病率高的细菌性传染病。3周龄以内的雏鹅感染率最高,死亡率高达80%。成年鹅往往呈阴性经过,但却成为本病的主要传染源,再加上传播途径广,所以一旦发生,便很难控制。近年来,随着养鹅业不断发展,对鹅沙门氏菌病的防治工作越来越重视。除疫苗免疫、综合性生物安全等防控措施外,抗生素的应用也发挥了巨大的作用,但是随之也出现了严重的耐药问题。本研究通过对鹅源沙门氏菌进
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鹅沙门氏菌病又称鹅副伤寒,是一种传播速度快、发病率高的细菌性传染病。3周龄以内的雏鹅感染率最高,死亡率高达80%。成年鹅往往呈阴性经过,但却成为本病的主要传染源,再加上传播途径广,所以一旦发生,便很难控制。近年来,随着养鹅业不断发展,对鹅沙门氏菌病的防治工作越来越重视。除疫苗免疫、综合性生物安全等防控措施外,抗生素的应用也发挥了巨大的作用,但是随之也出现了严重的耐药问题。本研究通过对鹅源沙门氏菌进行血清型鉴定、耐药性和耐药基因检测,以及治疗试验来探讨鹅源沙门氏菌耐药表型与所携带耐药基因间的关系,初步筛选合适的治疗药物,以期为鹅沙门氏菌病的防治提供理论依据。本研究通过对43株分离自辽宁和吉林部分地区共8个鹅场的疑似沙门氏菌进行选择性培养、PCR及血清型鉴定,获得鹅源沙门氏菌菌株;利用纸片扩散法检测鹅源沙门氏菌对12种抗菌药物的敏感性,利用PCR法检测β-内酰胺类、氨基糖苷类等药物对应的耐药基因29个,以获得鹅源沙门氏菌的耐药谱和其所携带的耐药基因情况;选择2株现场检出率较高的鹅源沙门氏菌进行攻毒和抑菌试验,首先用无菌生理盐水10倍倍比稀释菌液,选择5个浓度梯度进行接种,每只雏鸡灌服500μL菌液,观察记录雏鸡的生理状况及死亡情况,统计死亡只数,利用改良寇氏法计算所选沙门氏菌的半数致死量。然后依此进行攻毒和治疗处理,选取3日龄SPF鸡雏63只,随机分成7组,每组9只,分别为A~F组,其中A组为空白对照组,每只雏鸡灌服500μL无菌生理盐水,B组和E组为攻毒对照组,每只雏鸡分别灌服500μL的待检菌株I和待检菌株II。C、D、F和G组均为攻毒试验组,其中C组和D组雏鸡均灌服待检菌株I(剂量和浓度同B组),F组和G组雏鸡均灌服待检菌株II(剂量和浓度同E组),经12h后分别给药治疗,C组和F组每只雏鸡灌服沙立宁50μL,D组和G组每只雏鸡灌服头孢噻肟0.015 mg/g·体重,给药后每组分别于1 d、4 d、7 d各剖杀3只,观察雏鸡内脏变化,采集肝脏和盲肠,检测其载菌量并对其进行HE染色,观察组织病理学变化。研究结果如下:通过选择性培养、PCR及血清型鉴定,获得鹅源沙门氏菌21株,分别为乙型副伤寒沙门氏菌7株,甲型副伤寒沙门氏菌3株,丙型副伤寒沙门氏菌、德比沙门氏菌和阿贡納沙门氏菌各2株,伤寒沙门氏菌、汤卜逊沙门氏菌、曼哈顿沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌各1株;药敏试验显示,各种抗菌药物的耐药率分别为阿莫西林(85.7%)、四环素(81%)、磺胺异噁坐(81%)、氟苯尼考(71.4%)、氯霉素(76.2%)、卡那霉素(47.6%)、庆大霉素(38.1%)、诺氟沙星(19%)、环丙沙星(4.8%)、头孢噻肟(4.8%)、头孢哌酮(0%)和多粘菌素B(0%),且多重耐药现象较为严重,最高可耐8种药物。耐药基因检测结果显示,29种耐药基因中检出率为100%有11种,检出率超过一半的占80%,说明耐药基因在鹅源沙门氏菌中扩散广泛,且四环素类、磺胺类和氯霉素类药物的耐药表型与其相对应耐药基因的检测结果符合率为81%、氨基糖苷类52.4%,氟喹诺酮类23.8%、?-内酰胺类4.8%、多肽类0%,说明鹅源沙门氏菌的耐药性与其所携带的对应耐药基因有一定关系。根据上述试验结果,选择乙型副伤寒和鼠伤寒两株沙门氏菌作为后续试验对象。两者攻毒试验显示,两种沙门氏菌的半数致死量分别为4.40×10~6CFU/m L和1.43×10~7CFU/m L,头孢噻肟和沙立宁均有较好的抑菌作用,两者都可用于辽吉地区临床治疗鹅源沙门氏菌病。但对于乙型副伤寒沙门氏菌,前期沙立宁效果更明显,7 d时两者效果都较明显;对于鼠伤寒沙门氏菌,以4d时两者作用效果更好,尤其是头孢噻肟。对于肝脏而言,4 d时两种效果更明显,尤其是头孢噻肟;而盲肠则表现为前期效果明显,之后逐渐减弱,7 d时差异不明显。组织病变主要表现在肝脏局部细胞变性、坏死,炎性细胞浸润,大量的副伤寒结节。盲肠肠粘膜上皮细胞变性脱落,绒毛断裂,杯状细胞增加,炎性细胞浸润。给药治疗后,组织病变明显减轻。综上表明,辽吉地区鹅源沙门氏菌耐药现象较严重,其耐药性与其所携带对应的耐药基因有一定关系;头孢噻肟和沙立宁均有较好的抑菌效果,可以作为该地区鹅场临床治疗沙门氏菌病的用药。
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