利用植物表达轮状病毒VP6亚单位食用疫苗的研究

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本文以甜菜黑色焦枯病毒(BBSV)侵染性克隆为基础,用经植物偏好型密码子修饰的VP6基因(sVP6)替代BBSV的外壳蛋白(CP)基因。其体外转录产物用于机械接种BBSV的枯斑寄主苋色藜。接种后4-10天,提取发病叶片的总RNA及蛋白,利用RT-PCR或Westernblotting方法对sVP6的RNA转录和蛋白表达情况进行检测,成功构建了含轮状病毒VP6亚单位基因的植物双元表达载体pBVP6和pBinBB-sVP6。以分别含有这两种表达载体的农杆菌EHA101进行了甜菜转化,并对甜菜再生苗的外源基因整合情况进行了PCR、PCR-Southern和Southernblotting分析,以上结果为利用植物作为生物反应器,通过稳定表达或瞬时表达方式生产轮状病毒的可食用疫苗提供了新的技术途径和材料基础。
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