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蛋白质组学通过对生物体蛋白质的全景式分析,不仅能为生命活动规律提供物质基础,也能为众多的疾病和药物作用机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。克伦特罗（Clenbuterol）,是一种β2肾上腺素受体激动剂,有大量研究显示克伦特罗能增强脂肪分解和抑制脂肪沉积,但同时又具有很大的毒害性。对饲喂克伦特罗后香猪脂肪组织进行蛋白质组分析,有助于深入了解克伦特罗的作用机制;并且为开发新型、无副作用的产品打下理论基础。 本研究利用双向电泳分离技术,结合质谱鉴定技术,对经饲喂克伦特罗后香猪脂肪组织差异明显的蛋白质点进行研究。 首先,建立并优化了脂肪组织双向凝胶电泳技术方法: 1) 脂肪组织蛋白提取:采用液氮研磨→匀浆→裂解液（8M Urea,2M Thiourea,4% CHAPS,50mM DTT）裂解→室温离心的技术路线能较好的提取脂肪组织的可溶性总蛋白,避免脂肪等杂质成分对后续电泳的干扰。2) 制备胶的染色,采用blue silver法,比传统的考马斯亮蓝R250的灵敏度大大提高,并且不对质谱鉴定产生干扰。采用18cm,pH3-10的非线性IPG胶条,对脂肪组织总蛋白进行双向电泳后,分离出约1000个左右蛋白质点。 其次 对经饲喂克伦特罗后脂肪组织差异表达的蛋白进行了MALDI-TOF-MS鉴定,得到一个有意义的明显上调表达蛋白:Apo R。 经初步分析,推断Apo R参与了克伦特罗的下游作用,其具体的作用方式可能是通过结合经脂肪动员后的游离脂肪酸,辅助其分解代谢,从而达到促进脂肪分解,减少脂肪沉积的效果。