第一部分:TIG2基因在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义目的:研究TIG2在非小细胞肺癌组织中表达情况及预后意义,探讨TIG2在非小细胞肺癌的治疗方面的应用前景。方法:收集98例非小细胞肺癌肿瘤组织及其相对应癌旁组织。运用实时荧光定量RT-PCR、Western Blot以及免疫组化染色方法检测非小细胞肺癌肿瘤组织及癌旁组织标本中TIG2的表达。统计分析TIG2的表达与98例非小细胞肺癌患者各项临床病理参数之间的关系,分别通过COX多因素分析及Kaplan-Meier生存曲线分析TIG2的表达与患者各项临床病理参数之间及与患者预后的关系。结果:1.RT-PCR的结果显示:相对于癌旁组织,18/26的非小细胞肺癌肿瘤组织TIG2的m RNA表达水平降低,差异有统计学意义（P=0.003）。2.Western Blot结果显示:相对于与癌旁组织相比,16/20的非小细胞肺癌肿瘤组织的TIG2表达降低差异有统计学意义（p=0.0024）。3.98例非小细胞肺癌肿瘤组织及其相应癌旁组织的免疫组化染色结果显示:与癌旁组织相比,TIG2在非小细胞肺癌肿瘤组织中低表达,差异有统计学意义（p<0.05）。4.非小细胞肺癌患者组织中TIG2的低表达与淋巴转移（p=0.006）、肿瘤分期（p=0.021）以及肿瘤细胞的分化程度（p=0.025）相关,差异有统计学意义。而与其它临床参数年龄、性别、肿瘤大小、吸烟史、组织学分型和远处转移无明显相关（p均>0.05）。5.多因素分析中,TIG2的低表达（HR,2.225,95%CI,1.332-4.291;p=0.008）、肿瘤分期（HR,2.397,95%CI,1.426-3.048;p=0.038）和肿瘤细胞分化程度（HR,1.873,95%CI,1.270-3.392;p=0.012）是影响非小细胞肺癌患者预后的独立因素。6.TIG2低表达的非小细胞肺癌患者的生存时间相比较TIG2高表达患者降低,差异有统计学意义（p=0.003）。结论:TIG2在非小细胞肺癌肿瘤组织中低表达,其蛋白阳性表达于细胞浆中。在非小细胞肺癌中,TIG2的低表达与肿瘤的淋巴转移、肿瘤分期及肿瘤细胞的分化程度相关。TIG2低表达的非小细胞肺癌患者预后较差,TIG2是非小细胞肺癌的独立预后因素。第二部分mi RNA-3612/TIG2信号通路在非小细胞肺癌的作用机制研究目的:筛选可能与TIG2相关的mi RNAs,并探讨mi RNA-3612与TIG2的相关性,及mi RNA-3612/TIG2信号通路在非小细胞肺癌发生发展中的作用机制。方法:利用生物信息分析技术,获得TIG2相关的调控mi RNAs。采用体外培养的NCI-H1975细胞,PLGA/mi RNA-3612模拟物/抑制物纳米颗粒转染细胞,利用RT-PCR技术检测TIG2表达情况及细胞增殖迁移情况。建立bal/bc小鼠移植瘤模型,并观察小鼠存活情况。结果:1、mi RNA-3612类似物能够抑制TIG2的表达,而mi RNA-3612抑制物能够促进TIG2的表达,差异有统计学意义（p<0.01）。2、与空白对照相比,mi RNA-3612模拟物显著促进细胞增殖,而mi RNA-3612抑制物显著抑制细胞增殖水平,差异有统计学意义（p<0.05）。3、与空白对照组相比,mi RNA-3612模拟物组能够显著抑制TIG2蛋白的表达,而mi RNA-3612抑制物组能够显著上调TIG2蛋白表达,差异有统计学意义（p<0.05）。4、与对照组相比mi RNA-3612模拟物能够显著加速小鼠死亡,而mi RNA-3612抑制物能够显著降低小鼠死亡率,差异有统计学意义（p<0.05）。结论:mi RNA-3612类似物能够抑制TIG2的表达,而mi RNA-3612抑制物能够促进TIG2的表达。PLGA/mi RNA-3612模拟物/抑制物纳米颗粒给药系统能影响TIG2的表达并相应的影响非小细胞肺癌细胞的增殖,并进一步影响非小细胞肺癌的生存率。