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目的：利用细胞体外培养技术,研究去甲斑蝥素(noncantharidin, NCTD)诱导人乳腺癌细胞株Bcap-37凋亡的可能机制。方法：采用MTT法检测NCTD对乳腺癌Bcap-37细胞24h和48h的生长抑制作用,筛选药物最适浓度和最佳作用时间；AO/EB双染法、形态学观察来分析NCTD诱导乳腺癌细胞Bcap-37的凋亡变化；DNA凝胶电泳、彗星实验探讨细胞DNA的损伤情况；激光共聚焦显微镜技术检测NCTD对线粒体膜电位、细胞内活性氧等自由基以及Hsp70、Caspase-3蛋白表达的影响,并用流式细胞术分析NCTD诱导Bcap-37细胞凋亡与细胞周期变化的关系。结果：1.MTT检测结果表明,NCTD在体外具有抑制Bcap-37细胞增殖的作用,降低细胞的存活率(p<0.01),具有明显的量效和时间依赖性,其最佳浓度在10μg/ml左右；AO/EB染色后,通过荧光显微镜可观察到细胞凋亡的形态特征,如细胞变圆、胞膜褶皱、核碎裂等,并出现凋亡小体。2.流式细胞仪检测结果表明,NCTD可使G1期细胞比例明显降低,S期和G2/M期细胞比例升高,细胞凋亡率上升。通过DNA琼脂糖凝胶电泳和彗星实验表明,一定浓度的NCTD能够对Bcap-37细胞的DNA造成损伤,发生拖尾现象,并可见以约200bp为基数的DNA片断组成的“梯状”条带。3.NCTD可刺激Bcap-37细胞线粒体膜电位ΔΨm降低,使细胞内ROS含量升高,并同时增强H2O2的生成,抑制CAT酶的活性。4. NCTD作用24h后的细胞与对照组比较,抑癌基因蛋白Caspase-3的表达上调,差异有统计学意义(p<0.01)；热休克蛋白Hsp70的表达随药物浓度的变化而变化,与其对肿瘤细胞的双重调节功能吻合。结论：1.NCTD对Bcap-37细胞有较强的抑制增殖作用,呈时间-剂量效应关系；凝胶电泳结果可见细胞凋亡的典型DNA“梯状”条带和“彗星”拖尾现象。2.NCTD诱导Bcap-37细胞凋亡的机制与其干扰细胞周期有关,并呈现细胞周期阻滞现象。3.细胞内ROS含量增加,线粒体膜电位下降,显示线粒体氧化损伤途径可能是NCTD促进Bcap-37细胞凋亡的机制之一。4. NCTD通过调节Caspase-3、Hsp70蛋白的表达来实现诱导Bcap-37细胞的凋亡说明NCTD能影响癌细胞某些基因的表达并改变酶的生理活性,从而发挥其抗肿瘤作用。