【摘 要】
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(2S,3R)-2-氮杂双环[2,2,1]庚-5-烯-3-酮[以下简称(-)γ-内酰胺]是合成阿巴卡韦(abacavir)的原料,具有重要的应用价值。微生物酶法拆分(+/-)γ-内酰胺生产(-)γ-内酰胺具有良
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(2S,3R)-2-氮杂双环[2,2,1]庚-5-烯-3-酮[以下简称(-)γ-内酰胺]是合成阿巴卡韦(abacavir)的原料,具有重要的应用价值。微生物酶法拆分(+/-)γ-内酰胺生产(-)γ-内酰胺具有良好的应用前景。对已筛选出的能立体选择性水解(+/-)γ-内酰胺得到(-)γ-内酰胺的菌株L29-9进行紫外线诱变,再以紫外线诱变筛选出的高产菌株为出发菌株,进行化学诱变(硫酸二乙酯),使原始菌株发生基因突变,从大量突变株中筛选出一株高产、稳定的突变株L29-9-B-4,其酶活由原菌株的45U/g增加到539U/g。对L29-9-B-4产酶培养基及转化条件进行了研究。结果表明：当选择可溶性淀粉6g/L、牛肉浸膏5g/L、N-乙酰苯丙氨酸4g/L、pH7.0、温度30℃、培养时间40h时,通过完整细胞转化pH8.0的γ-内酰胺溶液,在30℃下经过2h的反应,产物(-)γ-内酰胺ee值99.8%。对L29-9-B-4的细胞固定化进行初步研究,采用几种固定化材料进行研究。结果表明采用聚乙烯醇、海藻酸钙联合包埋法进行细胞固定化的效果最佳。
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