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目的:研究不同浓度和不同的时间点的丙泊酚(propofol,PPF)对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)刺激大鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)凋亡和炎症因子的影响。方法:用原位支气管肺泡灌洗法分离大鼠AMs,经鉴定培养不同时间后进行如下实验。设PBS组,DMSO组,LPS组:(1μg/ml LPS),L+P1 组:(1μg/ml LPS 与 1μM PPF 同时刺激大鼠 AMs),L+P10 组:(1μg/ml LPS 与 10μM PPF 同时刺激大鼠 AMs),L+P25 组:(1μg/ml LPS 与 25μM PPF 同时刺激大鼠 AMs),L+P50 组:(1μg/ml LPS与 50μM PPF 同时刺激大鼠 AMs),L+P100 组:(1μg/ml LPS 与 100μM PPF同时刺激大鼠AMs),L+P300组:(1μg/mlLPS与300μM PPF同时刺激大鼠 AMs),L+PBS 组:(1μg/ml LPS 与 PBS 同时刺激大鼠 AMs),L+DMSO组:(1μg/ml LPS与DMSO同时刺激大鼠AMs)。MTT检测各组大鼠AMs的活力;瑞氏-姬姆萨染色法观察各组大鼠AMs的形态;Hoechst33258观察各组大鼠AMs细胞核形态;ELISA法测定各组大鼠AMs分泌肿瘤坏死因子-α(tumor-necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-12(interleukin-12,IL-12)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)。结果:1.MTT 结果显示:(1)LPS 组与 L+P1组、L+PBS组、L+DMSO组差异无统计学意义(P>0.05)。(2)在6h,24h,48h时,用1μg/ml LPS处理大鼠AMs,较PBS组显著提高细胞活力(P<0.05);用LPS和浓度为100μM或300μM的PPF联合处理大鼠AMs时,较PBS组显著降低(P<0.05);用1μg/ml LPS分别和浓度为10μM,25μM,50μM的PPF联合处理,对AMs无毒性。2.在显微镜下观察AMs瑞氏-姬姆萨染色:(1)PBS组和DMSO组的大鼠AMs密度适中,可见圆形和成纤维状细胞。(2)L+P10组和L+P25组的大鼠AMs较PBS组数量稍增多,体积较大,贴壁能力强,折光度好。(3)LPS组和L+P1组的大鼠AMs较PBS组密度、体积更大,立体感强,形似变形虫样改变,贴壁能力更强,呈抱团样改变。(4)L+P100组和L+P300组的大鼠AMs较PBS组数量明显减少,折光度差,呈浓缩状,贴壁能力弱。3.Hoechst33258染细胞核提示:(1)PBS组、DMSO组、L组、L+P1组、L+P25组、L+P50组大鼠AMs的细胞核呈弥散均匀的淡蓝色荧光。(2)L+P100组和L+P300组可见AMs胞核缩小变形,呈浓染致密的颗粒块状荧光。4.ELISA检测各组大鼠AMs培养上清中的细胞因子:(1)TNF-α:在6h时,LPS组与L+P25组、L+P50组、L+P100组相比分泌TNF-α的量升高(P<0.05)。(2)IL-12:在 24h 时,LPS 组与 L+P25 组、L+P50 组、L+P100 组相比分泌IL-12的量升高(P<0.05)。(3)IL-10:在24h和48h时,LPS组与L+P25组、L+P50组相比分泌IL-10的量升高(P<0.05)。(4)TGF-β:在24h时,LPS组与L+P1组、L+P50组相比分泌TGF-β的量降低(P<0.05);在48h时LPS组与L+P25组相比分泌TGF-β的量升高(P<0.05)。结论:在对大鼠的研究中PPF可以保护LPS诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)。