小鼠卵丘细胞自体与异体核移植的探索

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asdfghjkh
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本研究共分3个部分。首先是建立常规的小鼠体细胞核移植方法,具体以B6D2F1小鼠卵丘细胞作为核供体,用piezo操作系统把PVP处理的供体细胞核直接注入去核的同品系小鼠MII卵母细胞质中获得重构胚胎,用SrCl2激活后,再用CZB溶液培养至囊胚阶段。在此基础上,设计了下面的两组实验: a、把同一只小鼠的卵丘细胞核注射到同一只小鼠的去核卵母细胞内(简称自体克隆). b、把一只小鼠的卵丘细胞注入另一只小鼠的去核卵母细胞内(简称异体克隆),然后比较两种重组胚的体外发育能力。结果发现,自体克隆与异体克隆胚胎形成原核的比例(83.2%,89.9%vs95.8%)和卵裂比例(98.4%,93.6%vs98.5%)与孤雌激活对照间没有差异(p>0.05)。继续培养发现,自体和异体克隆胚胎发育至4-细胞(82.9%,80.8%vs95.7%)、桑椹胚(75.2%,70.4%vs92.8%)、和囊胚(31.8%,25.6%vs72.5%)阶段的比例显著低于对照组(p<0.05);两种处理间未见任何差异(p>0.05)。最后,进行了克隆胚胎的输卵管和子宫移植,其中自体克隆组移植了77枚原核胚和37枚囊胚,,异体克隆组移植了68枚原核胚和28枚囊胚,均无克隆小鼠出生。初步结果表明,核/质基因型的相同与否不影响克隆胚胎的体外发育能力,对克隆胚胎继续发育的影响还需深入的研究。
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