应激反应是机体创伤后作出的表现为以HPA轴兴奋为主的一系列神经内分泌的适应性综合反应。严重创伤机体往往出现过度应激,HPA轴异常亢进,发生创伤后应激反应紊乱,造成对机体的继发性损伤效应。严重颅脑创伤(TBI)后的应激紊乱是引发全身炎性反应综合征和多器官功能障碍综合征等继发性全身损害发生的重要因素。糖皮质激素受体(GR)的表达和功能下调是应激反应紊乱的发生发展过程中的一个重要因素,它和糖皮质激素(GC)的变化密切相关,而GC在TBI中不同时期具有对脑创伤的保护和继发加重脑损伤的双重作用。因此,调节HPA轴的兴奋性适时适度地控制机体的应激反应、维持机体的稳态、可能改善严重TBI后继发性的脑组织和全身损伤。设法弄清楚TBI后HPA轴的变化情况和原因,并进行应激调控,无疑为脑创伤的救治提供了新的思路。 海马是应激时控制HPA轴兴奋性最主要的脑区,其功能的改变导致神经冲动传导的改变从而影响HPA轴。海马功能的改变又与NMDA受体(NR)密切相关,而NR的过度激活可能是脑继发性损伤中一个重要的启动因素。NR的功能亚单位1(NR1)几乎具有NR的一切电生理和药理学特性,因此,我们选择海马NR1观察严重TBI后HPA轴变化,并加入NR非竞争性拮抗剂氯胺酮等进行干预,拟阐明其作用机制。 基于以上设想,我们建立了严重小鼠撞击伤清醒致伤模型,采用RT-PCR、Western-blot、ELISA、RIA等技术研究了:(1)严重TBI后HPA轴的变化;(2)严重TBI后海马NR1在mRNA、蛋白水平的变化;(3)严重TBI后脑皮质GR、肝脏GR的蛋白水平变化;(4)严重TBI后的血清细胞因子IL-1β,TNF-α的变化;(5)严重TBI后的血清中皮质醇、ACTH的变化;(6)加入咪唑安定—氯胺酮干预后以上观察指标的变化。主要研究结果及结论如下: 一、较成功地制作了严重小鼠撞击伤清醒致伤模型并观察了调控的整体效应 1、致伤后小鼠累计死亡率较高,神经行为学和运动功能评分、死亡小鼠肺组织水含量与对照组比较有十分显著的差异。说明致伤程度较重。 2、致伤后随机抽取小鼠作病理切片和扫描电镜分析,均证实了伤情,说明了模型