在骨骼肌的生长和发育过程中，肌肉生长抑制素(Myostatin, MSTN)是一种重要的细胞因子，参与肌肉生长的负调控。Gasp1、Gasp2、Cripto这三种基因可以通过调节MSTN的活性，参与骨骼肌发育调控。为了进一步研究猪Gasp1、Gasp2、Cripto基因对成肌细胞分化的影响，本试验通过RT-PCR从猪肌肉组织中扩增Gasp1、Gasp2、Cripto基因片段，并将phiC31载体作为骨架，构建含有三种不同基因的重组质粒(Gasp1-、Gasp2-、Cripto-phiC31)。将重组质粒转染至C2C12小鼠成肌细胞，用嘌呤霉素筛选获得稳定表达这三种基因的细胞系后，利用CCK-8法检测细胞的增殖能力。同时利用HE染色法观察分化3d时的细胞形态变化。并分别在细胞分化1d、2d、3d、4d、5d时收集细胞，采用Q-PCR检测MyoD、MyoG、P21及MHC肌细胞分化相关基因的表达变化，进而分析这三种基因对肌肉分化的影响。结果表明:成功克隆了猪Gasp1、Gasp2、Cripto基因，并成功构建了该基因的phiC31真核表达载体;转染C2C12细胞后，通过嘌呤霉素筛选成功获得稳定表达猪Gasp1、Gasp2、Cripto基因的C2C12细胞系;通过CCK-8法检测绘制生长曲线，发现猪Gasp1、Gasp2、Cripto基因可以促进C2C12细胞增殖;最后通过荧光定量检测MyoD、MyoG、P21、 MHC以及HE染色证实发现猪Gasp1、Gasp2、Cripto基因可以促进C2C12细胞分化。