湖南省猪、鸡源粪肠球菌及大肠杆菌耐药性与ERIC-PCR分型研究

来源 :湖南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pigho
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粪肠球菌和大肠埃希菌是人和动物肠道共生菌,在自然界中也广泛存在,常作为社区和养殖场中各种细菌耐药性发生情况的指示菌。抗生素的不合理使用现象普遍存在,细菌的耐药现象越发严重,且由于细菌的致病机制较为复杂,使得临床上治疗细菌感染更加困难。大量研究表明,细菌耐药性可以随着质粒的传播而传播,针对养殖场肠球菌和大肠杆菌开展耐药性调查对细菌感染的预防和治疗有着重要意义。本研究对湖南部分养殖场猪、鸡源粪肠球菌和大肠杆菌进行分离鉴定,并对相同宿主来源的粪肠球菌和大肠杆菌的耐药性及耐药基因进行检测,对粪肠球菌耐药基因aac(6’)-aph(2)能否向大肠杆菌转移进行研究,再利用ERIC-PCR方法对68对宿主相同的粪肠球菌和大肠杆菌进行分型,以初步了解该地区粪肠球菌和大肠杆菌的耐药情况及优势菌株的菌型,为预防和治疗粪肠球菌感染和大肠杆菌感染的用药提供依据。本次研究结果如下:(1)在本次实验中,共分离到180株粪肠球菌和222株大肠杆菌,其中宿主相同的粪肠球菌和大肠杆菌共68对。(2)通过药敏试验纸片扩散法对相同来源的68对粪肠球菌和大肠杆菌的耐药性进行判定,对分离的粪肠球菌进行12种常见抗菌药物敏感性试验,结果显示,受试粪肠球菌对红霉素、克林霉素严重耐药,仅发现一株耐万古霉素菌株,无耐奥格门丁与青霉素菌株。对分离的大肠杆菌进行11种常见抗菌药物敏感性试验,结果显示,被检大肠杆菌对四环素、磺胺异恶唑耐药情况严重。通过PCR方法对68对同源性粪肠球菌和大肠杆菌进行耐药基因检测,结果显示,粪肠球菌中氨基糖苷类、β-内酰胺类、大环内脂类药物耐药基因阳性率较高,没有检测到耐万古霉素基因。大肠杆菌中四环素耐药基因、氨基糖苷类耐药基因和磺胺类药物耐药基因检出率较高。(3)在转化转移实验和质粒结合转移实验中,大肠杆菌的接合子和转化子均从对庆大霉素敏感变为耐药,在转化子和接合子中均检测出aac(6’)-aph(2)基因,证明粪肠球菌可以通过转化、结合方式将氨基糖苷类药物的耐药基因传递给大肠杆菌。(4)采用ERIC-PCR方法并结合统计学软件对粪肠球菌和大肠杆菌进行分子指纹聚类图分析,结果表明,动物来源相同的菌株同源性较高,相同地区的菌株也具有较高的同源性,个别菌株来自同一地区但同源性不高,可能存在外源菌株感染的几率。
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