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褪黑素作为抗氧化剂,在雌性动物繁殖上发挥着重要作用。本实验以ICR雌性小鼠为实验模型,探讨饮水中添加不同浓度褪黑素（Melatonin,MLT）对雌性小鼠卵母细胞体外发育潜力的影响,以期为进一步提高家畜繁殖潜力提供参考。小鼠饮用水中添加不同浓度（0μg/mL、3μg/mL、30μg/mL和300μg/mL）褪黑素,自由采食三周（21天）后通过酶联免疫法检测血液中MLT、雌二醇（estradiol,E2）和促卵泡素（follicle-stimulating hormone,FSH）水平,苏木精-伊红染色法（hematoxylin-eosin staining,HE）分析卵巢中各级卵泡数,卵母细胞体外受精（in vitro fertilization,IVF）后体视显微镜下计数胚胎发育率以及通过q RT-PCR检测2-细胞胚胎和孵化囊胚中与凋亡、雌激素受体相关基因（BAX,BCL2,GPR30）m RNA的表达水平。结果如下:（1）持续饲喂含不同浓度褪黑素饮用水21天后,小鼠血液中褪黑素水平均在夜间11:00-01:00之间达到峰值,有较明显的节律性:21:00（230.74±4.94～256.2575±0.22pg/mL）开始上升,23:00达到峰值（336.63±23.43～321.25±33.99 pg/mL）后下降,凌晨5:00（241.14±16.03～268±20.42 pg/mL）恢复昼间水平,其中30μg/mL褪黑素添加组在白天9:00-17:00期间（269.80±17.75～274.89±17.08 pg/mL）及凌晨5:00（275.21±2.88 pg/mL）的血液MLT水平显著高于对照组（210.64±19.28～240.51±15.08,241.14±16.03 pg/mL）（P<0.05）;E2和FSH水平在所有添加褪黑素组与对照组之间无显著差异（P>0.05）;（2）经HE卵巢切片染色,30μg/mL褪黑素组小鼠卵巢单位面积内有腔卵泡数（15.65±3.29个/mm2）显著高于对照组（7.78±5.52个/mm2）（P<0.05）;（3）小鼠超数排卵获得的卵母细胞经IVF,其发育到2-细胞胚胎的能力与对照组间无显著差异（P>0.05）,当发育到孵化囊胚时,口服30μg/mL褪黑素组孵化囊胚率（85.70%±8.10）显著高于0μg/mL（72.10%±8.13）及300μg/mL（60.32%±17.24）褪黑素组（P<0.05）;（4）q RT-PCR结果显示:在2-细胞胚胎中,口服低浓度褪黑素组（3μg/mL,30μg/mL）BAX,BCL2与GPR30表达量均显著低于对照组（P<0.05）,300μg/mL褪黑素组GPR30基因和BCL2/BAX比值显著低于对照组（P<0.05）;当体外受精胚胎发育至孵化囊胚时,口服3μg/mL与30μg/mL褪黑素组BAX表达量显著低于对照组（P<0.05）;3μg/mL组BCL2表达量最低,但四个组间该基因表达均无统计学差异（P>0.05）,而30μg/mL褪黑素组BCL2/BAX比值显著高于对照组（P<0.05）,GPR30的表达量在三个褪黑素饲喂组中均显著低于对照组（P<0.05）。综上所述,小鼠饮水中添加不同浓度（0μg/mL、3μg/mL、30μg/mL和300μg/mL）褪黑素21天后,30μg/mL褪黑素可在白天期间提高小鼠血液中褪黑素浓度,但不会对FSH,E2的水平造成影响,各处理组与对照组小鼠血液中褪黑素仍呈现昼间平缓夜间达到峰值的节律性变化;同时,口服30μg/mL褪黑素可维持小鼠卵巢中优势卵泡的数量以及抑制孵化囊胚中凋亡基因的表达,进而可能提高卵母细胞IVF后的孵化囊胚发育率。