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目的探讨Wnt/β-catenin信号通路在HBx基因体外诱导大鼠卵圆细胞恶化过程中的作用,为阐明HBx基因和卵圆细胞在肝癌发生过程中的作用和机制奠定基础。方法建立转染HBx基因并表达稳定的卵圆细胞系(pEGFP-HBx-LE/6),用LE/6卵圆细胞及稳定转染pEGFP质粒的LE/6卵圆细胞(pEGFP-LE/6)作为对照细胞,运用Real-time PCR、细胞免疫化学染色法、细胞免疫荧光法和Western blot等技术观察和检测上述三种细胞在Wnt/β-catenin信号通路中关键因子β-catenin、cyclin D1及c-myc的表达差异,并分别运用倒置相差显微镜和透射电镜、MTT法和流式细胞术观察和检测上述三种细胞的细胞形态、细胞增殖和细胞周期的变化。设计并且合成特异的β-catenin的siRNA干扰序列片段,脂质体法转染pEGFP-HBx-LE/6卵圆细胞,细胞计数法检测转染干扰片段后实验组与对照组细胞的增殖情况。结果与对照组细胞相比,稳定转染HBx基因的卵圆细胞(pEGFP-HBx-LE/6)明显上调Wnt/β-catenin信号通路中的关键因子β-catenin,从而导致下游靶基因cyclin D1及c-myc的表达上升(p<0.05);光镜和电镜结果示pEGFP-HBx-LE/6卵圆细胞的体积增大且细胞核具有不规则异型;MTT法检测细胞增殖结果显示pEGFP-HBx-LE/6卵圆细胞的增殖较对照组细胞快;流式细胞仪检测细胞周期结果显示相对于对照组细胞,pEGFP-HBx-LE/6卵圆细胞的细胞周期从G0/G1期向S期和G2/M期推移,并且异倍体细胞的比例增高;转染特异的β-catenin的siRNA干扰片段后,pEGFP-HBx-LE/6细胞的增殖明显受到抑制(p<0.05)。结论HBx基因上调β-catenin的表达而激活Wnt/β-catenin信号通路是引起稳定转染HBx基因的卵圆细胞恶化及恶性增殖的途径之一。