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目的:探讨nesfatin-1预处理大鼠大脑中动脉脑缺血再灌(Middle Cerebral Artery Ischemia-reperfusion MCAO/R)损伤后对caspase-3、Bcl-2及Bax的表达变化。方法:实验采用SD雄性大鼠70只,随机分为假手术组(Sham组n=20)、手术组(I/R组n=25)、预处理组(nesfatin-1+I/R组n=25)。实验动物模型采用改良的Zea-Longa法制作。根据Longa评分法,对造模后大鼠下肢运动即行为学进行评分,通过longa评分的多少对MCAO/R组大鼠进行神经功能损伤程度的判定并确定造模成功的稳定性。对sham组仅做血管分离、I/R组、nesfatin-1+I/R组大鼠缺血2小时再灌24小时后采用断头法处死,脑组织采用0.2%TTC染液37℃水浴避光、染色,4%多聚甲醛固定24小时,测量不同组别的脑梗死体积百分比。各组造模稳定后:分别将各组大鼠断头处死取脑组织固定或超低温保存。采用苏木素-伊红染色法观察脑组织形态学变化,采用Tunel法染色观察皮质和海马神经细胞形态结构并统计各组神经细胞凋亡指数,采用免疫组织化学法和Western-Blot技术检测各组脑组织促凋亡蛋白caspase-3、Bax及抗凋亡蛋白Bcl-2的表达变化,最后统计各组数据差异是否具有统计学意义。结果:1.TTC染色结果显示sham组、I/R组、nesfatin-1+I/R组大鼠脑组织梗死体积百分比呈现先上升后下降的趋势,I/R组和nesfatin-1+I/R组脑梗死体积较sham组增大(p<0.05),nesfatin-1+I/R组与I/R组相比:人重组蛋白nesfatin-1对脑缺血再灌具有保护作用,脑梗死体积减少(p<0.05)。2.苏木素-尹红染色结果显示:各组脑组织固定、脱水、包埋、染色结果显示:sham组神经元数量、大小排列未见异常,未见神经元裂隙增宽现象,毛细血管未见增生、出血,脑皮质未见疏松现象。I/R组脑组织染色结果显示:神经细胞变性坏死、软化灶形成,胶质细胞略有增生,神经元裂隙明显增宽、裂隙内见有粉染絮状物,蛛网膜下腔淤血。nesfatin-1+I/R组与I/R组相比:人重组蛋白nesfatin-1减轻神经细胞变性坏死;减轻神经细胞水肿。3.Tunel细胞凋亡检测染色结果显示:I/R组和nesfatin-1+I/R组与sham组相比皮质、海马脑组织神经细胞核固缩、棕黄色颗粒增多。数据统计结果显示:I/R组和nesfatin-1+I/R组神经细胞凋亡指数高于sham组(p<0.05)。nesfatin-1+I/R组与I/R组比较:皮质、海马神经细胞核固缩、棕黄色颗粒减少,神经细胞凋亡指数减低(p<0.05)。4.免疫组织化学检测形态结果显示,sham组结果显示:caspase-3、Bax在脑组织神经细胞表达呈阴性;Bcl-2在脑组织神经细胞表达呈强阳性。I/R组结果显示:caspase-3、Bax在脑组织神经细胞表达呈强阳性;Bcl-2在脑组织神经细胞表达呈弱阴性。nesfatin-1+I/R组结果显示:脑组织神经细胞中caspase-3、Bax表达呈弱阳性;Bcl-2在脑组织神经细胞表达呈阳性。数据统计结果显示I/R组和nesfatin-1+I/R组中:蛋白caspase-3表达高于sham组(p<0.05);Bcl-2/Bax比值低于sham组(p<0.05)。nesfatin-1+I/R组脑组织神经细胞中蛋白caspase-3表达低于I/R组(p<0.05);Bcl-2/Bax比值高于I/R组(p<0.05)。5.Western-Blot检测结果显示:I/R组和nesfatin-1+I/R组中脑组织神经细胞蛋白caspase-3较sham组中caspase-3蛋白表达上调(p<0.05);Bcl-2/Bax比值较sham组下降(p<0.05)。nesfatin-1+I/R组中脑组织神经细胞蛋白caspase-3表达低于I/R组(p<0.05);Bcl-2/Bax比值较I/R组增高(p<0.05)。结论:1.在大鼠脑缺血再灌损伤中,nesfatin-1预处理对脑损伤具有保护作用,并能减轻脑组织形态结构的损伤。2.nesfatin-1预处理脑缺血再灌可以显著降低脑梗死体积,对脑损伤具有很大的保护效应。3.nesfatin-1抑制脑缺血再灌诱导神经细胞凋亡,其可能的作用机制为下调凋亡蛋白caspase-3、下调促凋亡蛋白Bax、4.nesfatin-1预处理脑缺血再灌损伤可能通过上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达路径实现对神经细胞凋亡的保护。