昆虫细胞培养技术是生命科学领域中的重要技术手段之一,已被广泛应用于生物学基础研究、医药开发、农牧业等领域。为满足某些应用及学科研究需求,仍需要发掘特定昆虫种类来源或者特定功能的昆虫细胞。而基于微流控芯片的细胞培养技术是目前细胞生物学研究中前沿的细胞培养技术之一,其具有许多独特优势,如高精度微流体操控、自动化控制实验流程、试剂试样消耗量低等。把微流控芯片技术运用于昆虫细胞培养中,将帮助研究学者拓展昆虫细胞培养及其生物技术的研究,开发其中蕴藏的巨大潜力。东亚飞蝗（Locusta migratoria manilensis Meyen）是危害严重的农业害虫之一,同时也是良好的实验模型,但其细胞学研究却相对缺乏,目前也尚未有东亚飞蝗相关细胞系建立成功的报道。本文选取东亚飞蝗进行其卵巢细胞体外培养技术研究,再结合微流控芯片技术,设计了一种可用于动物细胞培养的微流控芯片,开展基于微流控芯片的东亚飞蝗卵巢细胞培养技术研究。主要研究结果如下:1、东亚飞蝗卵巢细胞体外培养技术的建立。利用传统培养平台,通过对东亚飞蝗卵巢细胞原代培养条件进行研究,得到适宜的培养方法:东亚飞蝗体表用75%乙醇消毒50 min,无菌解剖出的卵巢组织再次选用75%乙醇消毒5 min。卵巢组织直接剪碎成组织块培养于培养瓶中,接种时培养基添加量为0.5 ml,后续培养逐渐补充培养基。培养基选用L-15作为基础培养基并添加10%胎牛血清。结果表明东亚飞蝗卵巢细胞在培养3d左右开始有组织块贴壁生长,5d左右可观察到从组织周围迁移出形态各异的细胞,16d左右组织或细胞贴壁紧密并开始相互连接,拉网生长。2、微流控芯片的设计、加工及测试。使用SolidWorks软件进行微流控芯片设计和三维建模,并对芯片进行流体力学仿真及加工工艺的优化,最后利用人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y评价微流控芯片的细胞培养效果。结果显示,选用PMMA及PS作为微流控芯片的制备材料,8mm适宜作为芯片腔室的厚度,芯片加工方式适宜通过在180℃下热压键合20min及环氧树脂灌封胶粘合来完成。SH-SY5Y细胞成功培养于微流控芯片中,细胞形态正常,可持续增殖,且未发生微生物污染问题,说明本文设计的微流控芯片可满足动物细胞培养需求。3、基于微流控芯片的东亚飞蝗卵巢细胞培养技术。在上述培养技术及芯片设计加工的基础上,开展了基于微流控芯片的东亚飞蝗卵巢细胞培养技术研究。结果显示卵巢细胞在芯片中培养至8d左右可观察到组织块贴壁,在适宜的条件下,目前东亚飞蝗卵巢细胞在微流控芯片的生长时间可达30天以上。本文建立的东亚飞蝗卵巢细胞体外培养方法,未来可应用于东亚飞蝗的细胞生物学研究中,也为建立细胞系提供技术上的借鉴;同时本文设计及加工的微流控芯片具有广泛应用于多种贴壁细胞培养的潜能,也为昆虫细胞培养提供新的研究平台。