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目的:子痫前期(preeclampsia,PE)是引起我国孕产妇死亡的主要原因之一,能够引起胎盘缺血缺氧,并伴随多器官损伤、水肿、神经系统异常等并发症。目前研究普遍认同引起子痫前期主要原因之一是螺旋小动脉重铸不足,而滋养细胞的增殖、迁移、侵袭、分化及凋亡等行为在螺旋小动脉重铸过程中起到了至关重要的作用。因此滋养细胞的功能在子痫前期的发生和发展中扮演着重要的角色。浆细胞瘤可变易位基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)属于长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)。近年来多项研究表明PVT1参与了肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭等多种生物学过程,但是其在重度子痫前期中对滋养细胞的影响及机制,目前尚未见研究及报道。因此本实验通过检测正常妊娠孕妇的胎盘组织和重度子痫前期孕妇的胎盘组织中PVT1的基因表达量,分析二者之间表达量的差异,然后在人绒毛膜滋养层细胞系(HTR8-S/Vneo)中,通过抑制或者过表达PVT1,来验证PVT1在重度子痫前期的影响及机制。方法:(1)选取15例重度子痫前期孕产妇为实验组,另选取15例正常妊娠孕产妇作为对照组,分娩后采集胎盘组织,运用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)检测胎盘组织中PVT1的表达量。(2)在HTR8-S/Vneo细胞中抑制和过表达PVT1后,通过CCK8、EDU、细胞迁移实验及蛋白免疫印迹实验(Western blot,WB)检测细胞的增殖、迁移和凋亡能力。通过Western blot检测AKT/m TOR信号通路的蛋白表达情况。(3)为了进一步探究其中的机制,在HTR8-S/Vneo细胞中添加m TOR抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)200 n M后,再加入过表达质粒Over-PVT1共孵育48 h。通过Western blot检测p-AKT、p-m TOR以及凋亡相关的Bax、Caspase-3、Bcl-2的蛋白表达,CCK8检测HTR8-S/Vneo细胞的增殖。结果:(1)重度子痫前期孕妇的胎盘组织中PVT1的表达量显著低于正常胎盘组织。(2)抑制PVT1后,HTR8-S/Vneo细胞的增殖及迁移受到抑制,凋亡增强;过表达PVT1后,HTR8-S/Vneo细胞的增殖及迁移能力明显增强,凋亡减弱。(3)抑制PVT1后,HTR8-S/Vneo细胞中的p-AKT、p-m TOR蛋白表达量显著下降;过表达PVT1后,HTR8-S/Vneo细胞中的p-AKT、p-m TOR蛋白表达量显著上升。(4)在HTR8-S/Vneo细胞中添加m TOR抑制剂Rapamycin(200 n M)后,再加入过表达质粒Over-PVT1共孵育48 h。结果显示与Over-PVT1组相比,Over-PVT1+Rapamycin组p-AKT、p-m TOR的表达量显著下降,HTR8-S/Vneo细胞的增殖减弱,凋亡增强。以上结果表明PVT1能通过调控AKT/m TOR信号通路来影响滋养细胞的增殖和凋亡进而参与PE的发生和发展。