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新城疫(NewcastleDisease，ND)是对养禽业危害重大的疫病之一，而新城疫活疫苗是用来预防该类疫病的主要疫苗。使用传代细胞制备新城疫活疫苗，可降低应用鸡胚来生产疫苗而污染一些垂直传播疾病病原的几率，避免散播其他疾病的危险，并可减少疫苗生产成本，简化生产方式;而耐热保护剂是稳定疫苗品质的关键技术，耐热保护剂解决了常规疫苗在保存、运输和使用过程中效力下降的难题，又节约了能源，其经济效益和社会效益巨大;冷冻干燥工艺是活疫苗耐热保护剂研制中的重要环节之一，它对活疫苗的性状、品质、效力以及稳定性等都会产生重要的影响。为此，对鸡新城疫低毒力细胞活疫苗进行耐热保护剂研制及冻干工艺优化的需求尤为迫切。
本研究以用传代细胞对鸡新城疫LaSota毒株进行增殖收获的细胞毒为对象，进行耐热保护剂的筛选及冻干工艺的优化。在初筛选出一组耐热保护剂的基础上，以该保护剂组成、预冻温度及时间、升华干燥温度及时间、解析干燥温度及时间为试验因素，应用L9(34)正交试验设计，进行9次冻干试验。冻干后计算各因素各水平下每种试验指标的数据的总和（Ki）以及平均值（Kij）、极差(R)，综合分析保护剂组成、预冻温度及时间、升华干燥温度及时间、解析干燥温度及时间对冻干后病毒含量、37℃保存7d病毒含量以及剩余水分含量的影响，筛选出保护剂最优组分及冻干曲线。结果:冻干后病毒含量平均值为107.64EID50/0.1ml，37℃7d病毒含量平均值为106.52EID50/0.1ml，剩余水分平均值为1.78％，均达到《中国药典》要求;优化的冻干曲线为:预冻温度为-50℃，维持4h，升华干燥过程为-50～-15℃，维持14h，解析干燥过程为-15～25℃，维持10h。结果表明，筛选出的保护剂及冻干工艺对鸡新城疫低毒力细胞活疫苗保护效果良好。
本研究对已筛选出的一组鸡新城疫低毒力（LaSota株）细胞活疫苗耐热保护剂及冻干曲线进行3批适用性验证，对3批活疫苗的基本性状、安全、效力、稳定性等进行检验，并将3批在2～4℃保存9个月的试验疫苗分别免疫雏鸡，测定抗体效价，并进行攻毒试验。结果:3批试验疫苗物理性状、溶解性、真空度、支原体检验、特异性检验、无菌检测、安全检验、剩余水分各项检验均达到《中国药典》要求。3批试验疫苗的热稳定性试验结果显示，在37℃保存21d后其病毒含量仍达到《中国药典》要求，且均优于常规对照苗;2～4℃不同保存时间试验结果表明，保存9个月后疫苗效力可达107.88EID50/0.1ml，高于《中国药典》106EID50/0.1ml的要求。3批试验疫苗的免疫保护试验结果显示:试验组HI抗体水平在免疫后21d达到最大，然后逐渐降低，对照组HI抗体水平逐渐降低，在14d就已测不到抗体;免疫鸡组攻毒后均未引起死亡，对照组全部死亡，表明制备的3批试验疫苗安全、有效。结果表明，应用筛选出的耐热保护剂及冻干曲线冻干的新城疫低毒力细胞活疫苗安全、有效，解决了兽用生物制品必须低温保存、运输使用问题，具有良好的市场应用前景。