肝动脉化疗栓塞联合动脉内灌注促肝细胞生长素治疗兔VX2肝癌的实验研究

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目的探讨肝动脉化疗栓塞联合促肝细胞生长素动脉内灌注治疗兔VX2肝癌的安全性及有效性。材料与方法1.在B超引导下建立兔VX2肝癌模型,2周后PET/CT筛选出病灶直径1-2cm左右的荷瘤兔作为实验对象。2. 30只荷瘤兔随机分为实验组和对照组,实验组分单纯TACE组(A组:超液化碘化油0.2ml/Kg+顺铂1mg/Kg)、TACE+局部肝动脉促肝细胞生长素灌注组(B组:超液化碘化油0.2ml/Kg +顺铂1ml/Kg +pHGF0.1ml/Kg)。对照组(C组:肝动脉造影并灌注生理盐水2ml),每组均为10只VX2肝癌模型兔。3.观察指标:①介入干预后瘤兔的一般情况;②分别于术前1天及术后3、7、28天抽血检查谷丙转氨酶(ALT),肝细胞生长因子(HGF),比较干预前后ALT及HGF变化情况;③分别于术前1天及术后28天测量肿瘤最大直径和最小直径(超声),计算肿瘤体积及肿瘤体积增长率,观察肿瘤体积变化情况;④术后28天行PET/CT检查,观察肿瘤转移情况,比较各组转移率的差别。⑤术后28天完成上述指标观察后处死实验动物,行HE染色及免疫组化染色(抗CD34染色),计算肿瘤微血管密度(MVD)。结果1.动物的一般情况3组动物术后一周内均出现不同程度的嗜睡,精神萎,拒食,恶心等现象,以A组最明显。动物死亡情况:A、B两组各有2只瘤兔死亡,C组有3只瘤兔死亡,均在干预后7天内死亡,死亡后动物及时补充。到动物处死前,A组动物的体重下降最明显,与B、C组相比差异有显著性(P<0.05)。2.肿瘤生长情况术后各组肿瘤体积、肿瘤体积增长率分别为A组:3.42±0.45cm3、316.77±82.44%;B组4.92±0.38 cm3、551.36±121.92%;C组8.11±0.52 cm3、818.70±231.27%。三组间两两相比肿瘤体积及肿瘤增长率差异均有统计学意义(P<0.05)。3.肿瘤转移情况术后第28天行PET/CT观察转移情况,其中最常见的转移部位是肝(22例次),其次为淋巴结(19例次)和肺(14例次)。各组的转移率分别为:A组=70%(7/10);B组=80%(8/10);C组=100%(10/10)。肝、肺、淋巴结转移3组两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。4. HGF干预前1天三组间血清HGF水平差异无统计学意义(P>0.05)。C组干预前后血清HGF水平差异无统计学意义(P>0.05)。A、B两组治疗后第3天血清HGF明显升高,分别为A=2.02±0.11ng/ml、B=4.63±0.75ng/ml;治疗后第7天A、B两组血清HGF逐渐下降,分别为A=1.87±0.10ng/ml、B=2.61±0.50ng/ml;术后3,7天三组HGF水平两两相比有明显的统计学差异(P<0.05),治疗后第28天A、B两组血清HGF水平基本恢复术前水平,分别为A=1.57±0.12ng/ml、B=1.56±0.08ng/ml。术后28天A、B、C三组HGF水平差异无统计学意义(P>0.05)。5.肝功能干预前1天三组间血清ALT水平差异无统计学意义(P>0.05)。A、B两组血清ALT水平治疗后第3天分别为A=133.85±3.80μ/L、B=84.29±4.10μ/L;治疗后第7天分别为A=80.31±2.40μ/L、B=56.57±3.06μ/L;治疗后第28天分别为A=51.74±3.74μ/L、B=39.57±2.31μ/L;表现为先升高后逐渐下降。C组的血清ALT水平干预后持续升高。治疗后3、7、28天三组血清ALT水平两两相比差异均有统计学意义(P<0.05)。6.肿瘤血管生成术后第28天选取肿瘤周边生长最旺盛的部分行石蜡包埋,计算各组肿瘤MVD(抗CD34染色,×200视野)分别为:A= 75.97±11.46,B =85.34±4.90,C =63.88±10.04。差异有显著性(F=13.533 P=0.000),且A组与B组、A组与C组两两比较差异皆有显著性(P<0.05)。结论1. TACE后血清HGF浓度显著升高,到7天逐渐下降,TACE后非肿瘤肝细胞增生可能是术后血清HGF水平升高的主要原因。2. TACE联合动脉内灌注促肝细胞生长素治疗兔VX2肝癌,可改善TACE术后的生存质量;明显改善TACE后肝功能的损伤。3. TACE联合动脉内灌注促肝细胞生长素治疗兔VX2肝癌,促进了TACE后新生血管生成及肿瘤体积的增长,但对TACE后肿瘤转移并无明显影响。
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