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本研究对实验获得的枸杞多糖(LBP)、牛膝多糖(ABP)以及蜂胶提取物(EP)进行了药效学、药动学及临床预试验,试图证明其促进奶牛乳腺免疫机能的作用,研究结果如下:
1.应用正交试验优化了微波提取工艺ABP:微波时间24min,火力9、料液比1∶20;LBP:火力9,微波时间16,料液比1∶15。ABP和LBP各分离到4个组分,平均回收率分别为98.08%和96.5%;苯酚-硫酸比色法在8h内显色稳定;λmax分别为288nm和290nm,在260nm-280nm之间无吸收峰;红外光谱显示ABP可能含有果糖和葡萄糖,LBP可能含有葡萄糖、鼠李糖、甘露糖;在25℃测得比旋光度分别为-6.7°和-150.0°;HPLC显示ABP和LBP分别由5种和6种单糖组成。
2.急性毒性试验表明,ABP、LBP及多糖混合物的LD50分别为19.05、20.42和4.71 g·kg-1,LD50>1.5g/kg属无毒性物质。
3.牛膝多糖的药代动力学表明,ABP在獭兔体内的药物动力学模型为二室模型,多糖在体内分布较快,消除较慢。
4.淋巴细胞增殖试验表明,ABP和LBP的OD值明显高于对照组(P<0.05),多糖混合物组的OD值与对照组相比差异极显著(P<0.01)。CY+多糖混合物组的OD值明显高于CY组(P<0.01)。多重比较6组OD值组间都存在着显著差异。
5.多糖的体外抑菌试验表明,ABP组、LBP组、EP组、ABP+LBP+EP组、LBP+乳炎康组各组不同浓度组的抑菌圈直径显著大于阳性对照组、阴性对照组(P<0.05);各组中随着浓度的增加,抑菌圈直径增大,抑菌效果增强。
6.多糖混合物的临床效果表明,(1)在不同剂量组中,500mg/乳区组效果较明显(P<0.01),SCC随着投药后天数的增加而减少;(2)不同给药途径中,乳区投药组与对照组相比,差异极显著(P<0.01),乳房基底部注射组与对照组相比,差异显著(P<0.05),肌肉注射组不显著(P>0.05)。(3)不同干奶剂型对SCC的影响中,产后4天内,水针剂组和混合物+PEG与乳炎康相比,SCC变化差异显著(P<0.05)和极显著(P<0.01),随着产后天数的增加SCC呈下降趋势。
7.ELISA法测定产后奶牛腹皮下静脉血中IFN-γ的含量变化结果表明,多糖混合物水针剂组和混合物+PEG组产后与干奶前比较IFN-γ含量上升且变化明显(P<0.05),而乳炎康组差异不显著(P>0.05);产后混合物水针剂组和混合物+PEG组的IFN-γ含量显著高于乳炎康组(P<0.05)。