祛风活血丸对EAU大鼠视网膜Notch1、Notch3、Jagged-1表达的影响

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目的:观察祛风活血丸对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)大鼠视网膜 Notch1、Notch3、Jagged-1 表达的影响,探讨祛风活血丸对EAU的疗效和作用机制。方法:将SPF级纯系健康雄性Lewis大鼠48只(96眼)按随机数字表法分为空白组和造模组,造模组在IRBP诱导下建立EAU大鼠模型,造模成功后按随机数字表分为模型组、祛风活血丸低倍组和祛风活血丸高倍组,每日在裂隙灯显微镜下观察眼部炎症反应,并参照Caspi评分标准进行炎症评分,取3只EAU大鼠和1只空白组大鼠眼球制作病理切片,进行组织病理学检查。免疫后祛风活血丸低倍组与祛风活血丸高倍组每天分别予以祛风活血丸4g/kg/d和8g/kg/d灌胃14天,模型组与空白组予以等量蒸馏水灌胃。实时荧光定量PCR检测视网膜中Notch1、Notch3、Jagged-1基因表达水平;④Western Blot技术测定视网膜中Notch 1、Notch3、Jagged-1蛋白的表达结果。结果:1.成功建立EAU大鼠模型。2.实时荧光定量PCR法测定Notch1、Notch3、Jagged-1结果显示:模型组Notch1、Notch3mRNA表达高于空白组和祛风活血丸干预组(P<0.01),模型组Jagged-1mRNA表达高于空白组低于祛风活血丸干预组(P<0.0 1);祛风活血丸低倍组与高倍组Notch1、Notch3、Jagged-1mRNA 表达无明显差异(P>0.05);3.Western Blot 检测结果显示:模型组Notch 1、Notch3蛋白表达高于空白组和祛风活血丸干预组(P<0.01),模型组Jagged-1蛋白表达高于空白组低于祛风活血丸干预组(P<0.01),祛风活血丸低倍组与高倍组Notch1、Notch3、Jagged-1蛋白表达无明显差异(P>0.05);结论:1.IRBP抗原-完全弗氏佐剂主动免疫Lewis大鼠,可以成功诱导EAU大鼠模型。祛风活血丸可能通过影响Notch信号通路调节影响自身免疫性葡萄膜炎。
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