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目的：通过正交设计实验优选出返魂草提取物水煎提取工艺；建立返魂草提取物的质量标准，为返魂草提取物的质量标准规范化研究及工业生产提供参考依据。方法：水煎提取工艺研究采用提取时间A，溶剂倍数B，提取次数C和温度D作为四因素三水平的正交实验设计。以绿原酸和咖啡酸的含量为指标，用高效液相色谱法测含量。色谱条件：流动相为乙腈-0.05%三氟乙酸水溶液（12：88），色谱柱为ＡlltimaTMC18（250mm×4.6mm,5um）;检测波长327nm;柱温21±2℃;流速1.0ml min-1;进样量20ul。返魂草提取物的质量标准研究，以薄层色谱和指纹图谱为定性方法，高效液相色谱法为定量方法，建立返魂草提取物的质量标准。薄层色谱的固定相为硅胶薄板，展开剂为乙酸丁酯-甲酸-水（7.5：2.5：1）的上层溶液。指纹图谱的建立采用高效液相色谱法，色谱条件为：色谱柱为ＡlltimaTMC18（250mm×4.6mm,5um）；流动相：0.05%三氟乙酸水溶液（A）-甲醇（B），洗脱方式为梯度洗脱，洗脱程序为：0-5min95%-95%A，5-15min95%-90%A，15-25min90%-90%A，25-40min90%-88%A，40-60min88%-85%A，60-70min85%-84%A，70-80min84%-82%A，80-90min82%-80%A，90-100min80%-80%A；检测波长327nm；柱温21±2℃；流速1.0ml min-1；进样量20ul。以咖啡酸和绿原酸为参照峰，选取10批样品测定色谱指纹图谱数据，然后用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004A）分析。含量测定以绿原酸，咖啡酸为对照品，采用高效液相色谱法，外标法定量,色谱条件为：色谱柱为AlltimaTMC18（250mm×4.6mm,5um）；流动相为乙腈-0.05%三氟乙酸水溶液（12：88）；检测波长327nm；柱温21±2℃；流速1.0ml min-1；进样量20ul。结果：返魂草提取物的最佳提取工艺条件为16倍体积分数水，100℃煎煮2.5h，提取2次，在此条件下，可获得较高的咖啡酸和绿原酸提取率。返魂草提取物质量标准的薄层色谱定性鉴别分离度好，专属性强。供试品与对照在相应位置显相同的斑点返魂草提取物的指纹图谱共有20个左右色谱峰,其中共有指纹峰9个,以绿原酸为参照峰（Ｓ1峰，3号峰），其他8个共有指纹峰的相对保留时间分别为：0.384，1.090，1.576，2.127，2.238，2.434，2.520，2.751;其他8个共有指纹峰的相对峰面积分别为：0.358,0.311，1.326，1.351，1.693，0.958，0.671，0.574。10批样品的指纹图谱数据在共有模式间的相似度大于0.9。返魂草提取物的含量测定，绿原酸在0.14μg～1.7μg，范围内线性关系良好，R=0.9972。平均加样回收率98.413%，RSD=2.1%（n=6）。，咖啡酸在0.02μg～0.25μg范围内线性关系良好，R=0.9999。平均加样回收率95.488%，RSD=1.3%（n=6）。绿原酸的含量为2.75mg·g-1，咖啡酸的含量为0.15mg·g-1。结论：返魂草提取物的提取工艺条件简单、稳定，提取率高。返魂草提取物质量标准的薄层色谱定性鉴别操作简单、稳定、专属性和重现性强，可作为其质量控制的定性方法。HPLC色谱指纹图谱可用于返魂草提取物的鉴别和质量控制。HPLC色谱法测定返魂草提取物中的绿原酸和咖啡酸的含量结果准确可靠，重现性好，可用于返魂草提取物质量控制。