第一部分:DADS对人结肠癌HT-29细胞生长抑制作用的研究 目的:探讨二烯丙基二硫(DADS)对人结肠癌HT-29细胞生长抑制作用的影响。 方法:倒置显微镜和光镜观察不同浓度和作用时间DADS对体外培养的人结肠癌HT-29细胞形态的影响;MTT实验、细胞计数法观察不同浓度和作用时间DADS对HT-29细胞的生长抑制作用;流式细胞术分析不同浓度和作用时间DADS对HT-29细胞的周期分布;免疫细胞化学图像定量分析不同浓度DADS诱导HT-29细胞周期相关蛋白表达变化。 结果:倒置显微镜观察:60、90、120μmol/L DADS处理24 h后,与对照组相比,部分HT-29细胞变圆,浮起于培养基中,浮起的细胞随DADS浓度的增大和时间的延长而增加。光镜观察和图象分析结果表明30、60、90、120μ mol/L DADS处理细胞24、4 8、72h后,细胞形态没有发生明显的改变,与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。 MTT比色法检测显示:DADS能显著抑制人结肠癌HT-29细胞增殖,呈浓度和时间依赖性。60、120、240μ mol/LDADS处理24h后,对癌细胞增殖的抑制率分别为23.1%、45.6%、56.5%(P<0.05),处理48h抑制率分别为28.4%、48.2%、65.3%与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。 细胞计数结果表明:60、120μ mol/L DADS对HT-29细胞具有明显抑制作用;常规培养HT-29细胞群体倍增时间为22.58 h,60、120μmol/L DADS作用HT-29细胞48 h后,其细胞群体倍增时间分别延长到31.2 h、82.1 h,与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05)。