论文部分内容阅读
目的:弓形虫是一种机会性致病原虫,寄生在一切脊椎动物的有核细胞内,能引发人兽共患的弓形虫病。由于缺乏毒性低、活性好的治疗药物,使得弓形虫病已成为世界上难以攻克的医学难题。因为传统的化疗药物存在不容忽视的毒副作用,所以迫切需要寻找更好的治疗药物。本研究采用体外和体内的实验方法对甘草、仙鹤草、百部、常山、鸦胆子5种药用植物进行抗弓形虫活性的筛选,以期发现具有抗弓形虫活性的药用植物,为以天然药物为来源的新型抗弓形虫药物的研发提供导向。方法:分别采用回流提取法、浸渍法、萃取法等对5种药用植物进行活性成分的提取。通过体外、体内实验对甘草、仙鹤草等5种药用植物进行抗弓形虫的活性研究。体外实验:用RH株弓形虫速殖子感染宿主细胞,经提取物处理,采用MTT比色法计算各提取物抗弓形虫活性的选择性指数(SI),并且显微镜下观察细胞状态。体内实验:通过建立急性弓形虫感染的动物模型,连续给药4天。第5天采集感染小鼠的血液,测定血清中ALT和AST含量;收集小鼠腹腔液并计数腹腔内速殖子的数量;解剖取出肝、脾组织称重并测定肝匀浆中GSH和MDA含量。根据体内外实验结果,选取抗弓形虫活性好的流份继续进行活性跟踪实验。结果:体外实验结果显示,常山总生物碱、百部醇提物和鸦胆子油的SI要优于螺旋霉素,表明这些粗提物具有一定的抗弓形虫活性。体内实验结果显示,常山总生物碱、百部醇提物、甘草总黄酮、鸦胆子油和鸦胆子醇提物能显著减少感染小鼠腹腔内速殖子的数量(P<0.05)。综合这些粗提物对肝脏的影响,发现鸦胆子油和鸦胆子醇提物不仅能抑制速殖子的增殖,而且还能减轻感染造成的肝损伤。鸦胆子油Fr.4流份层的SI优于螺旋霉素的SI,其他流份层的SI与螺旋霉素基本一致。流份层Fr.2和Fr.4能有效抑制弓形虫在宿主体内增殖,Fr.1、Fr.3和Fr.5的活性较弱,选取活性好的流份继续分离得到化合物油酸和亚油酸。化合物油酸和亚油酸不仅能缓解急性弓形虫感染引起的肝损伤,而且对弓形虫有一定的抑制作用。结论:常山总生物碱、甘草总黄酮、百部醇提物、鸦胆子油及鸦胆子醇提物的抗弓形虫作用均较为突出。鸦胆子油和鸦胆子醇提物不仅能抑制速殖子的增殖,而且还具有一定的保肝作用。常山总生物碱、甘草总黄酮、百部醇提物在作为抗寄生虫药物使用时可以配伍保肝药物。鸦胆子油中的流份层Fr.4具有明显的体内外抗弓形虫活性,其他流份层对弓形虫也存在一定的杀伤作用。油酸和亚油酸不仅具有一定的抗弓形虫的作用,而且能缓解弓形虫引起的肝损伤。